ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
1. Предложена теоретическая зависимость чувствительности метода от соотношения констант связывания трейсер-антитело и аналит-антитело для конкурентного поляризационного флуороиммуноанализа (ПФИА). Эта зависимость подтверждена соответствующими экспериментальными значениями для трех систем ПФИА. 2. Впервые синтезированы различные по структуре и составу конъюгаты производных 2,4,5-Т с флуоресцеином (трейсеры). Протестированы поликлональные антисыворотки против 2,4,5-Т и родственных соединений методом ПФИА. Выбраны иммунореагенты, обеспечивающие наиболее чуствительное определение 2,4,5-Т, а также их концентрации. Предел обнаружения метода составил 20 нг/мл, линейный диапазон определяемых концентраций 30-3000 нг/мл. 3. Получены флуоресцентные трейсеры на основе производных 2,4-Д; с помощью ПФИА охарактеризованы поликлональная антисыворотки и моноклональные антитела против 2,4-Д. Моноклональные антитела обладают большей аффинностью и специфичностью к 2,4-Д. Показано, что использование гетерологичного трейсера позволяет снизить предел обнаружения метода. Выбраны оптимальные условия определения 2,4-Д методом ПФИА. Предел обнаружения метода составил 0,1 нг/мл, линейный диапазон концентраций 0,3-640 нг/мл. 4. Синтезированы флуоресцентные трейсеры на основе производных ПХФ; методом ПФИА охарактеризованы поликлональные антитела против ПХФ и тио-ПХФ. Выбраны иммунореагенты и их концентрации, обеспечивающие наиболее чуствительное определение ПХФ. Предел обнаружения метода составил 10 нг/мл, диапазон определяемых концентраций 30-10000 нг/мл. 5. Показана возможность точного определения 2,4,5-Т, 2,4-Д м ПХФ методом ПФИА в образцах природной воды без предварительной пробоподготовки. Изучено влияние матрикса почв на результаты ПФИА 2,4-Д и 2,4,5-Т. Разработана экспрессная методика микроволновой экстракции хлорфеноксикислот из почв, позволяющая определять 2,4-Д и 2,4,5-Т методом ПФИА на уровне от 4 и 80 мкг/г соответственно. 6. Впервые синтезированы различные по структуре и составу конъюгаты производных пропанила с белками; подобран конъюгат, а также концентрации иммунореагентов, обеспечивающие лучшую чувствительность определения пропанила методом ИФА. Предел обнаружения метода составил 1 нг/мл, диапазон определяемых концентраций 0,1-100 нг/мл. 7. Показана возможность точного определения пропанила методом ИФА в образцах природной воды без предварительной пробоподготовки. Изучено влияние матрикса рисовых экстрактов на результаты ИФА пропанила. Разработана методика экстракции пропанила из зерн риса, позволяющая определять гербицид методом ИФА на уровне от 1 мкг/г риса. 8. Впервые разработана и оптимизирована методика твердофазного ИФА ацетохлора. Предел обнаружения метода составил 0,2 нг/мл, диапазон определяемых концентраций 0,2-100 нг/мл. Показана возможность определения ацетохлора в образцах природной воды без пробоподготовки. Изучено влияние матрикса яблочного сока и кукурузных экстрактов на результаты ИФА ацетохлора. Показана возможность определять гербицид в яблочном соке при концентрациях выше 10 нг/мл. Разработана методика экстракции ацетохлора из кукурузной муки, позволяющая определять гербицид методом ИФА на уровне от 10 нг/г.