ИСТИНА

Получен полиэлектролитный комплекс пероксидаза из корней хрена−хитозан, обладающий в два раза большей каталитической активностью, чем нативный фермент и стабильный в присутствии полярного органического растворителя ДМСО. Активирующее действие хитозана на пероксидазу в реакции окисления о-дианизидина пероксидом водорода обусловлено изменением рКа ионогенных групп субстрата-восстановителя и фермента. Обнаруженный эффект субстрат-субстратной активации при соокислении о-дианизидина и фенотиазинов (промазина, хлорпромазина и трифтор-перазина) пероксидом водорода, катализируемого полиэлектролитным комплексом пероксидаза−хитозан, использован для разработки методик определения указанных лекарственных веществ в водно-органических средах (на примере ДМСО). При проведении реакции окисления о-дианизидина, 3,3’,5,5’-тетраметил-бензидина и о-фенилендиамина в присутствии пероксидазы, включенной в прямые мицеллы ДДС и АОТ, стабилизируются промежуточные продукты окисления арилдиаминов, которые характеризуются бóльшими молярными коэффициентами поглощения, чем конечные продукты. Это позволило улучшить аналитические характеристики методик определения субстрата-восстановителя − цистеина и эффекторов пероксидазы − сульфаниламида и имидазола в водных растворах. При проведении реакции ферментативного окисления о-дианизидина 2-бутанонпероксидом и трет-бутилгидропероксидом в среде прямых мицелл значительно улучшаются кинетические параметры (kcat и kcat/Км) индикаторного процесса, а, вследствие этого, улучшаются метрологические характеристики методик определения органических пероксидов. Разработаны методики определения фенотиазинов и органических пероксидов в средах полярных (ДМСО) и неполярных (октан, бензол) органических растворителей соответственно. Показана возможность применения методик в анализе реальных нерастворимых в воде объектов на примере анализа органического экстракта из плазмы крови человека и оливкового масла соответственно.