ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Разработан способ получения прозрачных, механически прочных и каталитически активных пленок состава {пероксидаза-хитозан}, {тирозиназа-хитозан}, {лакказа-хитозан}, сохраняющих свои свойства после выдерживания в водных и водно-органических средах (в присутствии до 40% ДМСО, ацетонитрила, этанола).Предложена новая индикаторная система: взаимодействие продуктов ферментативного окисления фенолов с хитозаном с образованием ковалентно связанного с ним светопоглощающего аддукта, позволяющая регистрировать аналитический сигнал непосредственно в матрице биочувствительного слоя вне анализируемого раствора. На основе полученных пленок и предложенной индикаторной системы созданы оптические биосенсоры простой конструкции для определения фенольных соединений и органических пероксидов в объектах со сложной матрицей без предварительной пробоподготовки. В результате изучения влияния на чувствительность и селективность биосенсоров состава их чувствительного слоя, рН, концентрации, природы буферного раствора и фермента, температуры, содержания полярного органического растворителя (ДМСО) разработаны методики определения в водных или водно-органических средах растворимых и нерастворимых в воде фенольных соединений и органических пероксидов в диапазонах концентраций, соответственно: гидрохинона и пирокатехина - 20-200 и 25-250 мкМ; кверцетина, рутина, эскулетина - 10-200, 10-150, 10-150 мкМ; 2-бутанонпероксида и бензоилпероксида - 0.05-1 и 0.05-25 мМ. Продемонстрирована возможность применения сенсора, созданного на основе пленки {пероксидаза-хитозан}, для анализа реальных объектов (крема, геля, витамина в таблетках и порошка для приготовления инъекций) без отделения матрицы и полной гомогенизации анализируемого раствора, а также в присутствии органического растворителя ДМСО.