ИСТИНА

При функциональной разгрузке белки скелетных мышц частично подвергаются распаду, а m.soleus атрофии. В настоящее время не так много известно о молекулярных сигнальных событиях, лежащих в основе этого процесса. Атрофия связана со снижением белкового синтеза и резким увеличением протеолиза. При изучении атрофии рассматри-вают три катаболических пути: Са2+-зависимый, лизосомальный и АТФ-убиквитин зави-симый. Однако при атрофии, вызванной функциональной разгрузкой активность лизосо-мальных протеаз повышается незначительно. Заметный вклад в расщепление белков вно-сит активность Са2+-зависимых протеаз – кальпаинов. Кальпаины не являются конечной протеолитической системой. Кальпаины могут служить начальным звеном, запускающим убиквитинирование белков. Данный вопрос требует дополнительного исследования. Из-вестно, что Е3-убиквитин лигазы MuRF1 и MAFbx играют ключевую роль в атрофии мышц. Однако способы их регуляции и взаимосвязь с кальпаинами до конца не изучены. Так же известно, что при функциональной разгрузке происходит снижение синтеза белка. p70S6k часто используется как показатель активности сигнального пути mTOR. Однако данные по p70S6k в литературе противоречивые и требуют дальнейшего изучения в на-стоящей работе. В связи с этим основной целью нашей работы является изучение механизма регуля-ции катаболических сигнальных путей при атрофии скелетных мышц. Для достижения этой цели были сформулированы следующие задачи: 1. Исследование регуляции Е3-убиквитинлигаз 2. Изучение механизма запуска элонгационного фактора еF2. 3. Исследовать регуляцию μ-кальпаина. 4. Исследовать изменение pP70S6K и pP90 при 3х-суточном вывешивании. Эксперименты будут проводиться на модели функциональной разгрузки мышц задних ко-нечностей по методике Ильина-Новикова в модификации Morey-Holton. В данной работе предполагается использовать следующие методы: 1. Гель-электрофорез с последующим вестерн-блоттингом для определения относи-тельного содержания белков. 2. qPCR в реальном времени для определения уровня экспрессии некоторых белков. 3. Физиологические методы Данная работа позволит расширить представления о механизмах регуляции катаболических путей при мышечной атрофии. Раскрытие подобных механизмов предоставит возможность разрабаты-вать способы предотвращения мышечной атрофии при различных патологических состояниях.