ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Изобретение относится к медицине, а именно к области микробиологии, молекулярной генетике, и позволяет выявлять гены токсинов бактериального происхождения в образцах окружающей среды, продуктах питания, клинических образцах. Создают мультиплексную панель олигонуклеотидов для амплификации генов токсинов. Для этого осуществляют выбор олигонуклеотидов для таргетной амплификации на основании следующих критериев: длина олигонуклеотидов должна быть не менее 17 нуклеотидов; размер амплифицируемых фрагментов: от 200 до 600 нуклеотидов; праймеры не должны образовывать димеры и вторичные структуры; праймеры на разные мишени не должны образовывать димеры и вторичные структуры и должны быть собраны в мультиплексную панель; затем выполняют разработку на основании вышеуказанных критериев мультиплексной панели олигонуклеотидов для амплификации фрагмента гена дифтерийного токсина, гена стрептококкового токсина группы А, гена холерного токсина субъединицы А, гена холерного токсина субъединицы В, гена ботулинического токсина типа А, гена ботулинического токсина типа В, гена ботулинического токсина типа С1, гена ботулинического токсина типа D, гена ботулинического токсина типа Е, гена ботулинического токсина типа F, гена ботулинического токсина типа G, гена столбнячного токсина, получены их праймеры. Затем с помощью выбранных олигонуклеотидов были амплифицированы соответствующие участки генома микроорганизмов - Corynebacterium diphtheriae, Streptococcus pyogenes, Vibrio cholerae, Clostridium botulinum и Clostridium tetani.