ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Изобретение относится к биотехнологии, в частности, к получению гидролазы эфиров альфа аминокислот путем биосинтеза рекомбинантными бактериями. Сконструирован рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli ВКПМ В-11271 – продуцент гидролазы эфиров альфа аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ B 9915, полученный путем трансформации штамма-реципиента Escherichia coli BL21(DE3) плазмидной ДНК, соответствующей нуклеотидной последовательности SEQ ID NO 1, содержащей ген aehR гидролазы эфиров альфа-аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ B-9915, не модифицированный на 5'-конце последовательностью, кодирующей полигистидиновый «хвост», и находящийся под контролем промотора T7, а также ген устойчивости к канамицину Kan. Разработан способ микробиологического синтеза гидролазы эфиров альфа аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ B-9915 путем культивирования штамма–продуцента Escherichia coli ВКПМ В-11271, позволяющий получать гидролазу эфиров альфа-аминокислот в количествах не менее 4100 МЕ/г влажн. биомассы клеток, 22000 МЕ/г cух. биомассы клеток при уровне продукции не менее 50 МЕ/мг белка.