ИСТИНА

(57) Способ одновременного определения нескольких маркеров нейромедиаторного обмена в большом количестве образцов биологических жидкостей может быть использован в медицинской диагностике и биохимических исследованиях для количественного обнаружения катехоламинов и их метаболитов в биологических жидкостях с высокой чувствительностью и экспрессностью. Изобретение относится к новому способу одновременного определения нескольких маркеров нейромедиаторного обмена в большом количестве образцов биологических жидкостей, характеризующийся тем, что включает в себя получение флуоресцирующих производных катехоламинов, выбранных из норадреналина, дофамина, адреналина и их метаболитов, выбранных из гомованилиновой и ванилилминдальной кислот, методом ферментативной дериватизации с ароматическими аминами в качестве дериватизирующего агента (бензиламином или дифенилэтилендиамином) в присутствии в качестве биокатализатора пероксидазы из корней хрена в водной среде при комнатной температуре; процесс проводят с использованием микропланшетного оптического биосенсора; в качестве микропланшетного оптического биосенсора используют биосенсор, в котором формирование чувствительного слоя биосенсора осуществляют нанесением раствора пероксидазы из корней хрена и 1 мас. %-го раствора хитозана в каждую ячейку 96-луночного полистирольного планшета (Ø 6.54 мм). Микропланшетный оптический биосенсор по п.1 сохраняет свою каталитическую активность в течение шести месяцев при 4°С. Процесс предпочтительно проводят в 0.1 – 0.5 М CAPS-КОН с рН 11 или глицин-КОН с рН 8 буферном растворе при концентрации пероксидазы из корней хрена: 0.1 – 10 мкМ; концентрации пероксида водорода: 0.01 – 1 мМ; концентрации дериватизирующего агента: 0.1 – 100 мМ; концентрации определяемых соединений – катехоламинов и метаболитов: 0.005 – 5 мкМ в течение 5 мин. Возбуждение флуоресценции проводят в диапазоне λex = 305 – 356 нм, а регистрацию аналитического сигнала – в диапазоне λem = 420 – 480 нм. Для селективного одновременного определения нейромедиаторов в биологических жидкостях используют дополнительную математическую обработку флуоресцентного сигнала – производную спектрофлуориметрию 1-го и 2-го порядка. Способ позволяет повысить экспрессность определения нейромедиаторов – 96 проб за 20 мин и использовать его для массового анализа биологических жидкостей с целью диагностики заболеваний.