![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Данный проект будет выполняться в рамках задач совместной лаборатории (МАЛ) LIA1066. В рамках проекта предполагается провести несколько групп экспериментов, часть из которых будет выполняться французским партнером. Общей целью предлагаемого к выполнению проекта является изучение механизмов, лежащих в основе ВИЧ-ассоциированной релокализации хромосом. В качестве целей отдельных этапов предлагаемой к выполнению работы можно обозначить следующие: - идентификация ВИЧ-ассоциированного фактора(ов), вызывающего ядерную реорганизацию в нормальных В-клетках, в результате которой повышается вероятность нахождения локусов CMYC и IGH в непосредственной пространственной близости друг от друга - получение панели стабильных клеточных линий лимфоидной природы, несущих в себе элементы системы CRISPR-Cas9, позволяющие индуцировать внесение двухцепочечных разрывов в ДНК генов IGH и CMYC. - поиск механизмов, лежащих в основе ВИЧ-ассоциированной релокализации хромосом
Данный проект выполнется в рамках задач совместной лаборатории (МАЛ) LIA1066. В рамках проекта предполагается провести несколько групп экспериментов, часть из которых будет выполняться французским партнером. Общей целью предлагаемого к выполнению проекта является изучение механизмов, лежащих в основе ВИЧ-ассоциированной релокализации хромосом. В качестве целей отдельных этапов работы можно обозначить следующие: - идентификация ВИЧ-ассоциированного фактора(ов), вызывающего ядерную реорганизацию в нормальных В-клетках, в результате которой повышается вероятность нахождения локусов CMYC и IGH в непосредственной пространственной близости друг от друга - получение панели стабильных клеточных линий лимфоидной природы, несущих в себе элементы системы CRISPR-Cas9, позволяющие индуцировать внесение двухцепочечных разрывов в ДНК генов IGH и CMYC. - поиск механизмов, лежащих в основе ВИЧ-ассоциированной релокализации хромосом При выполнении первого этапа работы в 2015 году нами проведена подгоовительная работа, необходимая для получения панели клеточных линий, позволяющих индуцировать внесение двухцепочечных разрывов ДНК в специфические участки генов IGH и CMYC. Дизайн CRISPR-Cas9 системы, направляющих РНК, подбор метода и условий трансфекции, выбор оптимального промотора. Также проанализировано влияние инкубации нормальных В-клеток человека с препаратами ВИЧ на расположение в ядре локусов CMYC и IGH.
грант РФФИ |
# | Сроки | Название |
1 | 27 июля 2015 г.-31 декабря 2015 г. | Изучение механизмов, лежащих в основе ВИЧ-ассоциированной релокализации хромосом |
Результаты этапа: | ||
2 | 1 января 2016 г.-31 декабря 2016 г. | Изучение механизмов, лежащих в основе ВИЧ-ассоциированной релокализации хромосом |
Результаты этапа: В результате выполнения проекта в 2016 году нами была оценена эффективность создаваемой системы на предмет внесения двухцепочечных разрывов в ДНК локусов IGH и CMYC и анализ их локализации методом 3D FISH. | ||
3 | 1 января 2017 г.-31 декабря 2017 г. | Изучение механизмов, лежащих в основе ВИЧ-ассоциированной релокализации хромосом |
Результаты этапа: |
Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".