Результаты этапа: В 2018 году были исследованы некоторые механизмы, участвующие в регуляции энергетического обмена при нейродегенеративных и онкологических патологиях, а конкретно в клеточных моделях синуклеинопатии и злокачественной меланомы. Была разработана клеточная модель болезни Паркинсона на основе клеточной линии нейробластомы SH-SY5Y с повышенной экспрессией альфа-синуклеина дикого типа или мутанта A53T, склонного к агрегации. Данная модель была использована для сравнения скорости гликолиза в норме и при данной патологии, и было показано, что повышенная экспрессия альфа-синуклеина совместно с наличием его агрегатов в клетке ведет к увеличению секреции лактата и поглощения глюкозы, по крайней мере частично за счет ингибирования фермента глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (ГАФД), взаимодействующей с альфа-синуклеином. При изучении особенностей гликолитического обмена в меланомных клеточных линиях было показано, что в клетках MelP и Melkor продуцируется спермоспецифическая форма ГАФД (ГАФДс) без полипролинового домена на N-конце вследствие альтернативного сплайсинга. Скорость секреции лактата и поглощения глюкозы в данных клетках была выше, чем в остальных исследованных линиях меланомы, не продуцирующих ГАФДс. По результатам работы опубликованы одни тезисы международной конференции “BIOMEMRANES 2018”. Готовится к публикации манускрипт, посвященный методу получения стабильной клеточной линии с повышенной экспрессией альфа-синуклеина и ее преимуществам по сравнению с моделями, использующими транзиентную трансфекцию. |