ИСТИНА

В настоящее время химиотерапия является одним из наиболее частых методов лечения онкологических заболеваний, признанным во всем мире. Однако этот подход является очень токсичным для любого организма, так как ориентирован на создание санационного эффекта к быстро делящимся клеткам, в частности, находящихся в состоянии неконтролируемой атипичной дифференцировки, причем одним из принципов химиотерапии является уничтожение всех злокачественных клеток до того, как они станут нечувствительны к воздействию. При этом под токсическое воздействие попадают и другие активно делящиеся клетки, что приводит к нарушению естественных процессов обновления и репарации клеток костного мозга, волосяных фолликулов, сперматогенного эпителия, эпителия желудочно-кишечного тракта, элементов лимфатической системы и других. У любого метода лечения, использующегося в онкологии, приоритетными являются такие показатели как выживаемость и качество жизни. Сохранение репродуктивной функции пациентов является одной из актуальнейших задач сохранения качества жизни. Современные системы криохранения половых клеток не всегда способствуют сохранению репродуктивного потенциала пациента, так как биообразцы попадают на хранение с уже заранее сниженным репродуктивным потенциалом, кроме того, около 25% сперматозоидов гибнет при процессах консервации/реконсервации. В работах Проскурниной Е.В. (2016-2017) показано, что попадающие на криохранение половые клетки принадлежат пациентам с изначально сниженным овариальным и сперматогенным резервом и обладают низкой выживаемостью при криохранении, поэтому шансы на сохранение репродуктивного потенциала пациентов после химиотерапии невелики. В 2014-2016 г. на базе факультета фундаментальной медицины и Медицинского научно-образовательного центра МГУ имени М.В. Ломоносова был проведен цикл работ по исследованию протективных свойств секреторных компонентов мезенхимных стромальных клеток (МСК) человека на различных экспериментальных моделях. При этом введение кондиционированной среды, содержащей факторы роста и другие биоактивные компоненты, секретируемые МСК жировой ткани человека, под белочную оболочку яичка привело к эффективному восстановлению мужской фертильности на модели двухстороннего абдоминального крипторхизма у лабораторных животных. По данным проведенных испытаний морфологически было зафиксировано восстановление сперматогенеза до конечных форм сперматозоидов, которые выявлялись в достаточном количестве, чтобы достичь показателя фертильности. Результаты данной работы защищены рядом патентов и заявок на патенты, а также статей в международных журналах подтверждающие приоритет исследований в области заявляемого направления. Настоящее исследование проводится в рамках изучения репарационных свойств факторов роста МСК ЖТ на коллагеновом матриксе в тканях яичек лабораторных животных, использованных перед экспериментальной химиотерапией, совместно с экспериментальной химиотерапией на животной модели и после проведения химиотерапии у лабораторных животных. В рамках проводимого исследования планируется изучить степень нарушений сперматогенеза у животных при введении нелетальных доз препаратов для химиотерапии; определить максимальную степень повреждения сперматогенного эпителия при химиотерапии, при которой возможно наличие восстановления сперматогенеза до конечных форм; оценить сроки и степень восстановления сперматогенеза у животных после перенесенной химиотерапии; определить протективные свойства секреторных компонентов МСК человека на активность сперматогенеза у животных на фоне использования химиотерапии; определить качество восстановления сперматогенеза после использования секреторных компонентов МСК человека при индуцированных химиотерапией нарушениях сперматогенеза у животных; оценить степень повреждения нарушений сперматогенеза и возможности его восстановления с помощью секреторных компонентов МСК человека после нескольких курсов химиотерапии; отработать методы линейного контроля состояния сперматогенеза у крыс после химиотерапии и протективного лечения с помощью секреторных компонентов МСК человека; сформировать гипотезу механизма действия секреторных компонентов МСК человека на репарационные изменения тканей семенников; разработать предварительные рекомендации по защите сперматогенеза у пациентов, находящихся на химиотерапии онкологических заболеваний. На 1 этапе исследования будет проведен анализ литературы по влиянию лекарственных средств и химических соединений на сперматогенез, проведенных с целью выбора веществ, вызывающих наиболее тяжелые нарушения сперматогенеза, а также проведены работы по станадартизации биологического, спермиологического, морфологического и гормонального контроля за функцией семенников экспериментальных животных. На 2 этапе исследования с помощью ранее разработанных методов контроля (биологический, спермиологический, морфологический и гормональный) будет изучена активность собственных репаративных реакций в семенниках экспериментальных животных. На 3 этапе работы будет проведена оценка протективных и репрационных свойств КС с факторами роста МСК ЖТ, которые будут разделены на 2 большие группы: первая группа перед введением химиопрепарата за 1 сутки получить интратестикулярную инъекцию КС с ФР МСК ЖТ, вторая группа получит введение КС с факторами роста МСК ЖТ после введения химиопрепарата. Контроль будет осуществлен с помощью биологического, гистологического, иммуногисто-химического, гормонального и других видов анализа. На 4 этапе исследования одной из групп животных будет проведен курс химиотерапии под прикрытием КС с ФР МСК ЖТ, во второй КС с ФР МСК ЖТ будут введены после химиотерапии. Контроль будет осуществлен с помощью биологического, гистологического, сперматологического, иммуногистохимического, гормонального и других видов анализа. Цикл работ запланирован в течение периода 2018 -2020 г.

Currently, chemotherapy is one of the most common methods of treatment of cancer, recognized throughout the world. However, this approach is very toxic for any organism, since it focuses on creating a rehabilitation effect on rapidly dividing cells, in particular, those in uncontrolled atypical differentiation, and one of the principles of chemotherapy is the destruction of all malignant cells before they become insensitive to impact. At the same time, other actively dividing cells fall under the toxic effect, which leads to disruption of the natural processes of renewal and repair of bone marrow cells, hair follicles, spermatogenic epithelium, gastrointestinal epithelium, elements of the lymphatic system and others. In any treatment method used in oncology, such indicators as survival and quality of life are priority. Preserving the reproductive function of patients is one of the most urgent tasks of preserving the quality of life. Modern germ cell cryopreservation systems do not always contribute to the preservation of the patient's reproductive potential, since the biosamples are stored with pre-reduced reproductive potential, in addition, about 25% of the spermatozoa die during conservation / restoration processes. In the works of Proskurninina E.V. (2016-2017), it is shown that the germ cells that fall into cryopreservation belong to patients with initially reduced ovarian and spermatogenic reserves and have low survival during cryopreservation, therefore, the chances of preserving the reproductive potential of patients after chemotherapy are small. In 2014-2016, on the basis of the Faculty of Fundamental Medicine and the Medical Research and Educational Center of the Moscow State University named after M.V. Lomonosov carried out a series of studies on the protective properties of the secretory components of human mesenchymal stromal cells (MSCs) in various experimental models. At the same time, the introduction of a conditioned medium containing growth factors and other bioactive components secreted by the MSC of human adipose tissue, under the protein shell of the testicle, led to an effective restoration of male fertility in a model of bilateral abdominal cryptorchidism in laboratory animals. According to the data of tests carried out, morphologically, the restoration of spermatogenesis to the final forms of spermatozoa was recorded, which were detected in sufficient quantities to achieve the fertility rate. The results of this work are protected by a number of patents and patent applications, as well as articles in international journals confirming the priority of research in the field of the proposed area. This study is conducted in the framework of the study of the repair properties of growth factors of MSCT on collagen matrix in testicular tissues of laboratory animals used before experimental chemotherapy, together with experimental chemotherapy on an animal model and after chemotherapy in laboratory animals. As part of the study, it is planned to study the degree of impaired spermatogenesis in animals with the introduction of non-lethal doses of drugs for chemotherapy; determine the maximum degree of damage to the spermatogenic epithelium during chemotherapy, in which there may be a recovery of spermatogenesis to the final forms; estimate the time and extent of recovery of spermatogenesis in animals after undergoing chemotherapy; to determine the protective properties of the secretory components of human MSC on the activity of spermatogenesis in animals against the background of the use of chemotherapy; to determine the quality of recovery of spermatogenesis after using secretory components of human MSC in chemotherapy-induced disorders of spermatogenesis in animals; to assess the extent of damage to spermatogenesis disorders and the possibility of its restoration using the secretory components of human MSC after several courses of chemotherapy; to work out methods of linear control of the state of spermatogenesis in rats after chemotherapy and protective treatment with the help of secretory components of human MSC; form a hypothesis of the mechanism of action of the secretory components of human MSCs on reparation changes in the testicular tissues; to develop preliminary recommendations for the protection of spermatogenesis in patients undergoing chemotherapy for cancer.Phase 1 of the study will analyze the literature on the effects of drugs and chemical compounds on spermatogenesis, conducted to select the substances causing the most severe violations of spermatogenesis, and standardization of biological, spermological, morphological and hormonal control of the function of the testes of experimental animals is carried out. At stage 2 of the study, using the previously developed control methods (biological, spermiological, morphological and hormonal), the activity of one’s own reparative reactions in the testes of experimental animals will be studied. At stage 3, an assessment will be made of the protective and replication properties of QS with growth factors of MSCT, which will be divided into 2 large groups: the first group will receive an intra-testicular injection of KS with FR MSCTB in 1 day, the second group will receive CS with factors growth of MSC in adipose tissue after administration of a chemotherapy drug. The control will be carried out using biological, histological, immunohistochemical, hormonal and other types of analysis. At the 4th stage of the study, one of the groups of animals will undergo a course of chemotherapy under the guise of a CS with RF MSC VT, the second COP with RF MSC VT will be administered after chemotherapy. The control will be carried out using biological, histological, spermatological, immunohistochemical, hormonal and other types of analysis. A cycle of works is planned for the period 2018-2020.

Планируется оценить выраженность нарушений функции сперматогенного эпителия на фоне экспериментальной химиотерапии на животной модели. Планируется определить функциональные особенности сперматогенного эпителия у животных получивших терапию ФР МСК ЖТ на коллагеновом матриксе, до начала химиотерапии, на фоне использования химиотерапии, в периоде восстановления, после перенесенной химиотерапии.

По данному направлению у авторского коллектива имеется значительный научный опыт, оформленный в виде печатных работ, устных и стендовых докладов. Ряд технологий подтверждается патентами.

Планируется проведение преклинических испытаний ФР МСК ЖТ на коллагеновом матриксе с целью изучения протективных и репаративных возможностей по сохранению функции сперматогенного эпителия на фоне перенесенной химиотерапии.