| Результаты этапа: Исследования развертывались по двум основным направлениям. (1) Изучение строения гениталий и мышечной системы генитальных склеритов представителей ряда семейств двукрылых насекомых и параллельно этому (2) анализ последовательностей молекулярных маркеров ДНК этих же семейств.
Морфолого-анатомические исследования по теме.
В плане работы по склеритам гениталий и их мышцам закончено изучение семейств Strongylophthalmyiidae, Nothybidae, Diopsidae и Psilidae (Галинская и Шаталкин). Комплексное изучение склеритов и их мышц дала возможность выдвинуть продуктивные рабочие гипотезы относительно механизмов функционирования гениталий, основных преобразований в их строении при сравнении разных семейств, возможных синапоморфий и оценить на этой основе филогенетические связи семейств. Благодаря изучению мышц, выяснена разная природа парных придатков в гипандриальном комплексе. Изученные закономерности возникновения гипандриальных склеритов могут служить моделью для анализа соответствующих процессов вычленения склеритов гипандриального комплекса в продвинутых группах щеленосных мух.
Систематические исследования по теме.
По результатам изучения групп двукрылых описано 10 новых для науки видов. Составлены и опубликованы определительные таблицы по родам Strongylophthalmyia фауны Вьетнама и прилегающих территорий (Галинская и Шаталкин).
Обработаны большие палеарктические материалы по скатофагидам (Scathophagidae) родов Acerocnema Becker и Acanthocnema Becker; изучены типовые материалы; составлены определительные таблицы (Озеров).
Продолжалась работа над обзорной статьей по эволюции генитального аппарата мух надсемейств Diopsoidea, Nerioidea и Tephritoidea (Шаталкин и Галинская).
Молекулярные исследования:
Модифицирован и прошел успешную апробацию метод выделения ДНК из одной конечности сухого насекомого. Благодаря этому методу удалось выделить ДНК из обширного коллекционного материала Зоологического музея МГУ. Подобраны специфические праймеры для двукрылых ряда семейств и условия ПЦР для амплификации генов COI, COII, CytB, 12S, 28S, ND4, ITS1, ITS2, White, Wingless, Ef1. Получены сиквенсы генов COI, CytB, 28S представителей семейств Tanypezoidea, Sciomyzoidea, Lauxanoidea, Anthomyzoidea, Drosophiloidea и Muscoidea.
Впервые получены сиквенсы генов COII, CytB, 12S, 28S, ND4, ITS1, ITS2 для родов Nothybus, Teleopsis, Chyliza, Psila, Raineria, Calobata. Сиквенсы гена COI представителей семейства Nothybidae внесены в базу данных GenBank. На генетическом уровне выявлена аллопатрическая дифференциация вьетнамских популяций Nothybus kempi из двух удаленных друг от друга местообитаний, разделенных горами. Два других вида, N. biguttatus и N. sumatranus не показывают различий. Можно говорить о процессах генетической (скрытой) дифференциации популяций, представляющих начальные шаги на пути разделения материнского вида на два дочерних.
Результаты предыдущего гранта РФФИ (13-04-01638) дополнены новыми сиквенсами, обработаны, и на их основании построена новая кладограмма для изученных нами семейств Nerioidea и Diopsoidea.
Получены предварительные кладограммы по гену COI для представителей семейств Psilidae и Celyphidae (данные по другим отсеквенированным генам - CytB, 12S, 28S - сейчас обрабатываются).
Начаты исследования генетической популяционной изменчивости на основе анализа микросателлитных маркеров в семействах Stratyomyiidae и Calliphoridae.
Собраны материалы для секвенирования по надсемействам Diopsoidea, Nerioidea, и Muscoidea и по семействам Stratyomyiidae, Asilidae, Pipunculidae, Conopidae, Celyphidae, Clusiidae, Scathophagidae, Calliphoridae и ряда других (Галинская, Гусаков, Дьякова, Озеров, Шаталкин).
|
| Результаты этапа: 1. Продолжалось изучение морфологической и молекулярной эволюции мух сем. Psilidae. Построена кладограмма связей, основанная на сравнении особенностей строения склеритов и мышц гениталий самцов. Соответствующая статья находится в печати и в настоящий момент дополняется по рекомендации рецензента. Результаты реконструкции филогенетических связей по молекулярным данным не удовлетворили авторов и сейчас идет перепроверка исходных данных в попытке понять, с чем это может быть связано.
2. По результатам сравнения митохондриальных 16S и 12S рДНК и ядерной 18S рДНК были рассчитаны филогенетические связи родов мух подсем. (Asilidae, Diptera). Ранее две аналогичные работы были выполнены американскими авторами, в основном на материале американской фауны. Их результаты давали разную картину связей. Настоящая работа была выполнена на палеарктическом материале, включающем ряд эндемичных родов фауны России и прилегающих территорий. В этом заключается ценность проведенного исследования, поскольку появилась возможность соотнести полученные результаты с американскими данными, которые, как было сказано, давали несогласованные по структуре реконструкции. Полученная в настоящем исследовании структура связей надродовых групп показывает хорошее соответствие с результатами реконструкции связей американских ктырей, выполненной T. Dikow с соавторами. По предварительной оценке причины несогласованности американских данных между собой связаны с техническими особенностями использованных методов расчета кладограмм.
3. Предложено новое в понимании вида, вытекающее из молекулярно-генетических исследований последнего десятилетия. Вид рассматривается в качестве фиксированной категории объектов, отличной от родов (надвидовых таксонов). Предварительные результаты доложены на VIII всероссийской микологической школе-конференции и опубликованы в материалах конференции (Шаталкин, 2017)
4. Изучен материал по семейству Celyphidae (Diptera) Вьетнама. Впервые произведено изучение участка гена COI (баркодинг), показано, что данный метод применим для разграничения видов в семействе Celyphidae. |
