![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Планируется провести исследования процесса иммобилизации спин-меченого фермента лизоцима на твёрдофазных оксидных носителях, представляющих собойбинарные системы SiO2-TiO2и Al2O3-SiO2, путемего закрепления на поверхности, как с помощью физической сорбции, так и ковалентным пришиванием спин-меченого фермента. Информация, полученная из ЭПР спектровпарамагнитнойметки, позволит количественно определить степень иммобилизации ферментаи способегозакрепления на поверхности твёрдофазного оксидного носителя. Также в работе планируется изучить влияние кислотности среды на степень иммобилизации ферментов.
It is planned to study the process of immobilization of spin-labeled lysozyme enzyme on solid phase oxide carriers, which are SiO2 – TiO2 and Al2O3 – SiO2 binary systems, by fixing it on the surface, both by physical sorption and by covalently sewing on a spin-labeled enzyme. Information obtained from the EPR spectra of the paramagnetic marks will allow us to quantitatively determine the degree of immobilization of the enzyme and the way of attachment on the surface of a solid-phase oxide carrier. It is also planned to study the effect of acidity of the medium on the degree of immobilization of enzymes.
По завершению проекта ожидаемыми результатами будут: - Разработка и апробация новой методики определения содержания иммобилизованных ферментов на твёрдофазныйноситель, состоящий из смешанных оксидов, методом ЭПР с использованием в качестве метки нитроксильного радикала. - Установление взаимосвязи между динамическими параметрами ЭПР спектров спин-меченого белка и типом иммобилизации его на твердом оксидном носителе. - Изучение влияния рН на процесс иммобилизации фермента на твёрдом носителе путём физической сорбции. - Изучение процесса иммобилизации фермента на носителе, представляющий собой индивидуальные SiO2, TiO2, Al2O3 и смешанные оксидные системы SiO2-TiO2 и Al2O3- SiO2.
Были проведены исследования по синтезу высокопористых бинарных ксерогелей TiO2-SiO2 с содержанием TiO2 7, 24, 50 мол%, и их Cu2+-содержащих аналогов, используя золь- гель технологию в отсутствии катализаторов - кислот и щелочей. Было показано, что варьирование соотношения оксидов в бинарной системе позволяет изменять физико-химические свойства полученных материалов в широких пределах. Также были подобраны соотношения TiO2/SiO2, при которых синтезированные образцы обладают наиболее выгодными физико- химическими показателями. Материалы, полученные в результате такого синтеза, являются высокопористыми и обладают развитой удельной поверхностью (свыше 250 м2/г). На основании исследования методами ИК, рентгеноструктурной и ЭПР спектроскопии были выдвинуты предположения о фазовом составе и комплексообразующих свойствах материалов. В частности, методами ИК и рентгеноструктурной спектроскопии была выявлена смешанная Ti-O-Si фаза, также рентгеноструктурным методом анализа была зафиксирована стабилизация анатазной модификации диоксида титана на смешанных титан-силикатных образцах. Были проведены измерения локальных значений рН внутри пор исследуемых образцов методом ЭПР с использованием рН - чувствительного спинового зонда. Для индивидуальных SiO2, TiO2, синтезированных в водно-аммиачной атмосфере, характерен отрицательный заряд поверхности. Сопоставление этих наблюдений с данными ИК-спектроскопии, позволило предположить, что рост отрицательного заряда поверхности связан именно с образованием смешанной Ti-O-Si фазы.
грант РФФИ |
# | Сроки | Название |
1 | 15 июля 2019 г.-31 декабря 2019 г. | Метод ЭПР нитроксильных радикалов в исследовании иммобилизации ферментов на твердофазных оксидных носителях |
Результаты этапа: Лизоцим куриного белка был помечен парамагнитным нитроксильным фрагментом в положение his-15 с использованием 4-йодоцетамид-2,2,6,6-тетраметилперидин-N1-оксила. Спин-меченый белок был иммобилизован на поверхности серии оксидных носителей - SiO2, TiO2, Al2O3, TiO2-SiO2 и нанотрубчатого алюмосиликата галлуазита (HNT). Иммобилизация осуществлялась путем физической адсорбции, а также с помощью двух различных методик ковалентного пришивания. Проведено количественное сравнение эффективности иммобилизации. Путем компьютерного анализа спектров ЭПР иммобилизованного спин-меченого лизоцима установлена преимущественная ориентация молекул белка на поверхности носителей. |
Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".