Молекулярный анализ микроорганизмов цикла азота нефтезагрязненных почв и использование его потенциала в целях биоремедиацииНИР

Molecular analysis of nitrogen cycle microorganisms in oil-contaminated soils and application its potential for bioremediation

Источник финансирования НИР

грант РФФИ

Этапы НИР

# Сроки Название
1 10 июля 2019 г.-10 июля 2020 г. этап 1
Результаты этапа:
2 4 ноября 2020 г.-4 ноября 2021 г. Высокопроизводительное секвенирование ДНК и характеристику почвенных микробиомов, ответственных за трансформацию соединений азота в нефтезагрязненных торфяных почвах
Результаты этапа: Дерново-подзолистые и торфяные почвы составляют значимую часть почвенного покрова России и занимают до 26% всей площади территории. Нефть и нефтепродукты являются основными загрязняющими веществами для почв этих типов. Целью данного этапа работы было определение филогенетического и функционального разнообразия микроорганизмов дерново-подзолистой и торфяной почвы, загрязненной и незагрязненной углеводородами, выявление присутствия архей в составе микробного комплекса нефтезагрязненных почв. В библиотеках гена 16S рРНК из нефтезагрязненных образцов дерново-подзолистой почвы были выявлены последовательности представителей доменов Bacteria и Archaea (Манучарова с соавт., 2021). В составе почвенных сообществ преобладали бактерии филумов Proteobacteria (53.1%), Acidobacteria (19.0%), Actinobacteria (12.2%), Gemmatimonadetes (6.8%), Bacteroidetes (3.1%) и Firmicutes (1.5%). Обнаружены представители филумов Nitrospirae (2.1%), Verrucomicrobia (1.2%) и архей (0.2%). На родовом уровне в нефтезагрязненных образцах преобладали альфапротеобактерии рода Sphingomonas (34.7%) и Acidobacteria (13.3%). Нефтезагрязненные почвы были также проанализированы на наличие ферментов цикла азота, участвующих в диссимиляционном восстановлении нитратов до молекулярного азота и нитратредукции с образованием аммония, а также в ассимиляционном восстановлении нитрата до аммония (Manucharova et al., 2021). Установлено, что в нефтезагрязненных образцах представленность фермента нитратредуктазы, катализирущего восстановление нитрата до нитрита в процессах денитрификации и диссимиляционной нитратредукции, была сравнительно высокой, как и представленность остальных ферментов этих путей, катализирующих восстановление нитрита до молекулярного азота и аммония, соответственно. Наибольший вклад в преобразование азота в сообществах нефтезагрязненных почв вносили Alphaproteobacteria родов Sphingomonas, Bradyrhizobium и Pseudolabrys, среди которых известны виды, способные к денитрификации. Важно отметить, что источником энергии (окисляемым субстратом) для этих микроорганизмов служили нефтепродукты. В соответствии с представленностью в библиотеке рибосомальных генов, бактерии родов Brevundimonas, Stenotrophomonas и Streptomyces характеризовались наибольшей потенциальной активностью в преобразовании соединений азота, деградации хлоралканов, хлоралкенов и бензоата. Продолжена работа по изучению микробных сообществ торфяных почв, наиболее распространенных в регионах активной нефтедобычи. Проведено комплексное исследование микробной биомассы полных профилей низинных торфяников различного генезиса с целью оценки микробного потенциала биодеградации нефти (Головченко с соавт., 2021). Запасы микробной биомассы в расчете на трехметровый профиль торфа, оказались высоки. Микробная биомасса была представлена как прокариотной, так и эукариотной составляющими. Их соотношение менялось по профилю. В деятельном слое торфяников преобладала эукариотная биомасса, в инертном слое – преимущественно прокариотная. Структура прокариотной биомассы была однотипной по всему профилю. В ней доминировали бактерии, на долю актиномицетного мицелия приходилось не более 15%. Высокая активность микроорганизмов цикла азота (фиксация азота и денитрификация) наблюдались по всему профилю нефтезагрязненных торфов: активность нитрогеназы была максимальна в средней части торфяных отложений, а активность денитрификации оставалась высокой в большей части профиля. Полученные результаты указывают на значимый потенциал микробной трансформации нефти в торфяных почвах при отсутствии кислорода за счет использования окисленных соединений азота в качестве конечных акцепторов электронов при деструкции нефти и нефтепродуктов в торфяных почвах.
3 8 февраля 2022 г.-31 декабря 2022 г. Обработка и обобщения полученных результатов. Подготовка публикаций
Результаты этапа: Проведен сравнительный анализ архейных сообществ почв в условиях загрязнения нефтью. Результаты исследований дают современное представление о распространении и активности таумархеот в нефтезагрязненных почвах России, что позволит разработать новые подходы биоремедиации почв от нефтяного загрязнения.

Прикрепленные к НИР результаты

Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".