![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Планируется провести на цитогеронтологической модели "стационарного старения" тестирование некоторых известных геропротекторных препаратов, оказывающих влияние на продолжительность и качество жизни модельных животных объектов, а также некоторых потенциальных геропротекторов. Основным способом оценки будет построение кривых выживания клеточных культур в стационарной фазе роста и их последующий анализ, в качестве дополнительной характеристики будет определяться проявление в клетках известных биомаркёров "клеточного возраста". Предполагается исследование на той же модельной системе влияния нескольких метаболических ингибиторов и стрессирующих факторов. В некоторых случаях будет изучено влияние геропротекторов на подвергнутые стрессу или воздействию ингибиторов непересеваемые клеточные культуры.
It is planned to conduct, using cytogerontological "stationary phase aging" model, testing of some well-known geroprotective drugs which affect the duration and quality of life of model animal objects, as well as some potential geroprotectors. The main method of assessment will be the construction of survival curves of cell cultures in the stationary phase of growth and their subsequent analysis, the manifestation of known "cell age" biomarkers in the cells will be determined as an additional characteristic. The study on the same model system is supposed to evaluate influence of several metabolic inhibitors and stressors. In some cases, the effect of geroprotectors on stress- or inhibitory-treated nonsubcultured cell cultures will be studied.
1. Усовершенствование модели “стационарного старения” клеточных культур – в частности, условий культивирования и поддержания клеток в длительном эксперименте. 2. Анализ кинетики вымирания и построение кривых выживания культуры клеток в опытах с разными условиями культивирования и в экспериментах по определению геропротекторных свойств изучаемых препаратов. 3. Внедрение демографических подходов в математический анализ продолжительности жизни культуры клеток с расчетом соответствующих показателей. 4. Поиск потенциальных геропротекторных препаратов с помощью разрабатываемой модели. 5. Поиск подходящих для модели биомаркёров клеточного “возраста”. 6. Тестирование разных способов определения жизнеспособности клеток; выбор способа, оптимального для экспериментов с использованием модели “стационарного старения” культур клеток. 7. Опубликование статей в рецензируемых научных журналах (2-3 статьи в год), выступление на международных конференциях с докладами (2-3 конференции международного охвата в год).
Тема является продолжением Гостемы АААА-А16-116021660098-8 (2016-2020 гг.) "Исследование механизмов старения и тестирование геропротекторов или геропромоторов в экспериментах на клеточных культурах и клетках зародышевого пути". Проведены эксперименты по сравнению нескольких способов оценки жизнеспособности "стационарно стареющих" культивируемых клеток, в том числе методом определения способности клеток к образованию колоний. Установлено, что для подсчёта количества живых и мёртвых клеток необходимо снимать адгезивные культуры клеток с поверхности роста, чтобы избежать искажения получаемых результатов. К данным о кинетике вымирания клеток применён новый способ их обработки, который позволяет проводить сравнение кривых выживания и определять показатели, характеризующие продолжительность жизни клеток в непересеваемой культуре. Для математического моделирования и расчётов разработаны две компьютерные программы. Подобраны оптимальные условия культивирования для проведения экспериментов с использованием модели "стационарного старения". Подробно изучено влияние экзогенного 8-оксо-2’-дезоксигуанозина на пролиферацию и "стационарное старение" культивируемых клеток китайского хомячка B11-dii FAF28. Определены локализация накопления экзогенного 8-оксо-2'-дезоксигуанозина в клетках, а также динамика поглощения ими этого соединения из культуральной среды. Установлено, что препарат снижает среднюю продолжительность жизни культуры клеток на 6%. Проведено исследование, направленное на определение митогенных и цитотоксических свойств двух потенциальных геропротекторов – метформина и рапамицина. Обнаружены геропротекторные свойства у изотонического препарата “Квинтон” – он увеличивает среднюю и максимальную продолжительность жизни культуры клеток на 7% и 11% соответственно.
госбюджет, раздел 0110 (для тем по госзаданию) |
# | Сроки | Название |
1 | 1 января 2021 г.-31 декабря 2021 г. | Исследование механизмов старения и тестирование геропротекторов или геропромоторов в экспериментах на клеточных культурах |
Результаты этапа: Проведены эксперименты по сравнению влияния нескольких способов “голодания” на плотность растущей и пребывающей в стационарной фазе культуры клеток. Установлены оптимальные режимы, при которых не происходит преждевременного вымирания клеток. Исследована применимость в рамках модели “стационарного старения” оценки наличия/содержания липофусцина как биомаркера возраста. Изучены профили экспрессии генов, связанных с аутофагией, нормальным функционированием лизосом и метаболизмом лактата как в клетках разного возраста, так и в клетках, подвернутых воздействию стрессирующего фактора – хлорида аммония. Проанализированы (с акцентом на данные, касающиеся терминально дифференцированных постмитотических клеток) как результаты собственных исследований, так и многочисленные литературные данные, посвящённые возможным механизмам влияния ограничения питания на продолжительность жизни и старение. По результатам анализа опубликованы обзорно-аналитические работы и гипотеза. Выполнены предварительные исследования возможности применения иммортализованных клеток человека (с активированной теломеразой) в модели "стационарного старения". Начаты эксперименты (на линии "1608") по изучению кинетики роста и последующей гибели в стационарной фазе иммортализованных фибробластов человека. | ||
2 | 1 января 2022 г.-31 декабря 2022 г. | Исследование механизмов старения и тестирование геропротекторов или геропромоторов в экспериментах на клеточных культурах |
Результаты этапа: Показана применимость как модели "стационарного"/хронологического старения, так и старения после дифференцировки к иммортализованным мышечным клеткам человека. В рамках обеих моделей в "старых" клетках проявляется активность ассоциированной со старением бета-галактозидазы. Построены и проанализированы кривые роста, пребывания в стационарной фазе и вымирания мышечных клеток в модели "стационарного" старения без смены (преждевременное старение) и с регулярной сменой среды. Изучены профили экспрессии белков, связанных с аутофагией и функционированием митохондрий, в клетках китайского хомячка разного "стационарного" возраста. Проведён анализ результатов своих предыдущих исследований и литературных данных о роли холестерина в развитии возрастных болезней и старении. Собрана и систематизирована информация о современных способах моделирования старения на клеточных культурах и о тестировании средств для борьбы с болезнью Альцгеймера в лабораторных исследованиях. Опубликовано несколько обзорно-теоретических статей, посвященных рассмотрению этих вопросов, а также разработан учебных курса "Основы биологии старения" для студентов МГУ. | ||
3 | 1 января 2023 г.-31 декабря 2023 г. | Исследование механизмов старения и тестирование геропротекторов или геропромоторов в экспериментах на клеточных культурах |
Результаты этапа: В исследованиях с использованием "стационарного"/хронологического старения клеток китайского хомячка и иммортализованных миобластов человека оценено влияние миметика ограничения питания метформина на продолжительность жизни культуры клеток и проявления ассоциированного со старением секреторного фенотипа. Применительно к миобластам человека адаптирована модель стресс-индуцированного преждевременного старения. Проведены тесты на определение митогенных и цитотоксических свойств миметика ограничения питания акарбозы. На основе анализа литературных данных о фундаментальных механизмах патогенеза болезни Альцгеймера и о результатах доклинических и клинических исследований сенотерапевтических препаратов опубликованы обзорные работы. Существенно дополнен учебный курс "Основы биологии старения" для студентов МГУ. | ||
4 | 1 января 2024 г.-31 декабря 2024 г. | Исследование механизмов старения и тестирование геропротекторов или геропромоторов в экспериментах на клеточных культурах |
Результаты этапа: | ||
5 | 1 января 2025 г.-31 декабря 2025 г. | Исследование механизмов старения и тестирование геропротекторов или геропромоторов в экспериментах на клеточных культурах |
Результаты этапа: | ||
6 | 1 января 2026 г.-31 декабря 2026 г. | Исследование механизмов старения и тестирование геропротекторов или геропромоторов в экспериментах на клеточных культурах |
Результаты этапа: | ||
7 | 1 января 2027 г.-31 декабря 2027 г. | Исследование механизмов старения и тестирование геропротекторов или геропромоторов в экспериментах на клеточных культурах |
Результаты этапа: |
Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".