ИСТИНА

Убиквитин-протеасомная система деградации белка осуществляет основной регулируемый протеолиз в клетке. Нарушения в работе этой системы часто приводят к опухолевой трансформации клеток или к развитию таких заболеваний, как болезнь Паркинсона. Стоит отметить, что цикл работ по использованию ингибиторов протеасом в терапии рака был удостоен в 2004 г. Нобелевской премии по химии. Недавние исследования обнаружили присутствие протеасом во внеклеточном пространстве. Интересен тот факт, что у онкологических больных наблюдается повышенное содержание протеасом в плазме крови, что позволяет рассматривать их в качестве онкомаркеров при диагностике рака. Кроме того, повышенное содержание протеасом наблюдается во внеклеточном альвеолярном пространстве при дыхательной недостаточности и во время воспалительных процессов в легких. Объяснение этого феномена на сегодняшний день отсутствует. Предполагается, что привлечение протеасом необходимо для удаления накапливающихся во внеклеточном пространстве белков, активации секретируемых клетками белков-предшественников, а также для процессинга антигенов. Однако ни свойства секретируемых клетками протеасом, ни механизм секреции на сегодняшний день не исследованы, что отдаляет перспективу использования внеклеточных протеасом в качестве маркеров онкологических и других заболеваний. Проект направлен на изучение особенностей субъединичного состава внеклеточных протеасом с целью определения в дальнейшем их функции во внеклеточном пространстве, что позволит рассматривать их в будущем в качестве терапевтической мишени в медицине. Разработка новых более эффективных методов выделения и очистки внеклеточных протеасом также является важной проблемой в протеомных исследованиях. В предлагаемом проекте аффинно-очищенные внеклеточные протеасомы будут получены из среды, кондиционированной в культуре клетками человека. Субъединичный состав внеклеточных протеасом будет определен с помощью MALDI FT-ICR масс-спектрометрии. Особое внимание будет уделено распознаванию специфических посттрансляционных модификаций внеклеточных протеасом в сравнении с внутриклеточными комплексами с помощью MALDI TOF/TOF масс-спектрометрии, что позволит оценить вклад этих модификаций в процесс выхода протеасом из клеток. Полученные в ходе исследования данные позволят приблизиться к пониманию молекулярных механизмов функционирования и биологической роли внеклеточных протеасом, а также управлению их активностью с целью достижения терапевтического эффекта при различных патологиях.