|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Действие синтетических CpG-олигодезоксинуклеотидов на полиморфноядерные лейкоциты человекаНИР
- Руководитель НИР: Судьина Г.Ф.
- Участники НИР: Вирясова Г.М., Галкина С.И., Голенкина Е.А., Пирожкова Е.Б.
- Подразделение: Отдел биокинетики
- Срок исполнения: 12 мая 2013 г. - 31 декабря 2015 г.
- Номер договора (контракта, соглашения): 13-04-00496
- Номер ЦИТИС: 01201355570
- Тип: Фундаментальная
- Приоритетное направление научных исследований: Структура и функции биологических макромолекул и макромолекулярных комплексов. Биокатализ.
- ПН России: Науки о жизни
-
Рубрики ГРНТИ:
- 31.27.37 Биорегуляторы. Гормоны и другие биологически активные соединения
-
Ключевые слова:
5-липоксигеназа, апоптоз, олигодезоксинуклеотиды, нейтрофил, лейкотриены
-
Описание:
Суть проекта – это экспериментальное исследование действия синтетических олигодезоксинуклеотидов (ODN) разной структуры на клеточные функции нейтрофилов человека, включая характеристику восприимчивости таких клеточных ответов как фагоцитоз, синтез 5-липоксигеназных метаболитов и апоптоз к добавлению CpG-ODN, а также определение специфичности и уровня ответа в действии CpG-ODN на нейтрофилы в зависимости от содержания неметилированных фрагментов CpG, включая фосфоротиоатные ODN.
-
Основные результаты:
При взаимодействии полиморфноядерных лейкоцитов (нейтрофилов) с микробами образуются 5-липоксигеназные метаболиты арахидоновой кислоты – лейкотриены и оксикислоты, которые играют огромную роль в иммунном ответе. Нами разработана перспективная экспериментальная модель, позволяющая варьировать в широком диапазоне продукцию лейкотриенов (LTs), 5-гидрокси-эйкозатетраеновой кислоты (5-HETE) и 5-оксо-эйкозатетраеновой кислоты (5-oxo-ETE). Нами впервые показана регуляторная роль окиси азота NO в процессе образования 5-oxo-ETE при взаимодействии нейтрофилов человека с опсонизированным зимозаном или бактериями Salmonella typhimurium. Результаты проведенного исследования показали, что 5-oxo-ETE - это ключевой метаболит в трансформации 5-липоксигеназных продуктов в нейтрофилах, когда к клеткам поступает NO в процессе их взаимодействия с объектом фагоцитоза. Исследование действия CpG-ODN на фагоцитоз и синтез лейкотриенов в нейтрофилах показало, что TLR9 агонист CpG-2142 (5’-tcgcgtgcgttttcgcgttttgacgtt-3’) и poly-A-ODN, CpGA22 (5’-aaaaatgacgttaaaaaaaaaa) повышают фагоцитоз и синтез лейкотриенов при взаимодействии нейтрофилов с опсонизированным зимозаном и бактериями Salmonella typhimurium. Для poly-A-ODN замена CpG на GрС не играет роли, а для CpG-2142 снижает эффект ODN. TLR9-антагонист G-ODN (5’- ctcctattgggggtttcctat-3’) ингибирует синтез лейкотриенов при взаимодействии нейтрофилов с зимозаном или бактериями Salmonella typhimurium. G-ODN наиболее эффективно блокировал образование 5-oxo-ETE . CpG-2142 и G-ODN повышали конститутивный и стимулированный фагоцитозом апоптоз нейтрофилов.
- Добавил в систему: Судьина Галина Федоровна
Источник финансирования НИР
| грант РФФИ |
Этапы НИР
| # | Сроки | Название |
| 2 | 12 мая 2014 г.-31 декабря 2014 г. | Действие синтетических CpG-олигодезоксинуклеотидов на полиморфноядерные лейкоциты человека |
| Результаты этапа: Исследовалось действие синтетических олигодезоксинуклеотидов CpG-ODN на синтез лейкотриенов в нейтрофилах, а также на апоптоз нейтрофилов. Исследование дейстния TLR9 агониста CpG2142 на нейтрофилы человека показало, что замена CpG наGpC практически не влияла на дейстие данного ODN. Получены экспериментальные данные по влиянию числа повторов ttaggg в структуре TLR9 антагонистов на действие ODN на апоптоз и синтез лейкотриенов. Для TLR9 антагонистов наблюдалась корреляция количества повторов ttaggg в структуре ODN c их действием на апоптоз и синтез лейкотриенов в нейтрофилах при взаимодействии нейтрофилов с бактериями Salmonella Typhimurium. Опубликованы новые экспериментальные данные по регуляции синтеза 5-оксо-ЕТЕ в нейтрофилах . | ||
| 3 | 30 марта 2015 г.-31 декабря 2015 г. | Действие синтетических CpG-олигодезоксинуклеотидов на полиморфноядерные лейкоциты человека |
| Результаты этапа: Исследовано действие производных CpG-ODN2216 с различным числом фосфодиэфирных и фосфоротиоатных связей на синтез лейкотриенов в нейтрофилах и апоптоз нейтрофилов. Ускорение апоптоза происходило только в присутствии фосфоротиоатных производных. На синтез лейкотриенов наибольший эффект оказывали смешанные структуры CpG-ODN2216 с poly(g) по концам и фосфодиэфирными связями в середине последовательности, - эти структуры ингибировали образование 5-липоксигеназных метаболитов. CpG-ODN2216 с фосфоротиоатными связями индуцировали образование супероксида и синтез окиси азота в нейтрофилах. Мы предполагаем, что активные формы кислорода и азота играют основную роль в регуляции апоптоза и синтеза лейкотриенов под действием CpG-ODN2216 с различным числом фосфодиэфирных и фосфоротиоатных связей. | ||
Прикрепленные к НИР результаты
Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".