| 1 |
17 сентября 2010 г.-31 декабря 2010 г. |
Анализ литературных данных, аналитический обзор, выбор и обоснование направления исследования. |
| Результаты этапа: 1.1. Проведение патентных исследований.
1.2. Формирование основных требований к разрабатываемой комплексной методике на основе биотехнологий.
1.3. Анализ литературных данных, написание аналитического обзора по существующим аналогичным методикам оценки параметров взаимодействия лигандов с функциональными молекулами ионных каналов.
1.4. Поиск и анализ аналогичных аппаратно-методических решений для научных исследований в области фармакологии.
|
| 2 |
1 января 2011 г.-15 июня 2011 г. |
Разработка методики синтеза наночастиц. Подбор условий для экспрессии и очистки функциональ-ных молекул ионных каналов. Получение комплексов наночастиц с модельным белком и нейротоксином. Определение основных свойств комплексов. |
| Результаты этапа: 2.1. Разработка общей методики синтеза наночастиц. Оценка аппаратных возможностей.
2.2. Получение наночастиц. Определение физических характеристик полученных частиц.
2.3. Подбор условий для экспрессии и очистки функциональных ионных каналов.
2.4. Разработка общей методики получения комплексов наночастиц с белками.
2.5. Получение комплексов наночастиц с модельным белком. Определение оптических свойств и стабильности комплекса. Определение размеров комплекса.
2.6. Разработка методики получения комплексов наночастиц с нейротоксином. Определение стабльности комплекса. Оценка сохранения активности нейротоксина при связывании с наночастицей.
|
| 3 |
16 июня 2011 г.-31 декабря 2011 г. |
Разработка методики определения констант связывания блокаторов с ионным каналом с использованием конкурентных ингибиторов in vivo и in vitro. |
| Результаты этапа: .1. Оценка экспрессии белка ионных каналов в культуре клеток с использованием флуоресцирующих комплексов наночастиц и нейротоксина на конфокальном микроскопе. Оценка активности комплекса. Оценка специфичности связывания с использованием модельного конкурентного ингибитора.
3.2. Экспрессия и очистка белка модельного ионного канала.
3.3. Оптимизация аппаратных средств для проведения измерений флуоресценции. Адаптация методики к измерениям флуоресценции на многофункциональном планшетном детекторе.
3.4. Определение константы связывания модельного ингибитора ионного канала с применением флуоресцирующих комплексов наночастиц и нейротоксина.
3.5. Оценка стабильности очищенного белка и измерения связывания с комплексом наночастиц и нейротоксина на планшетном многофункциональном детекторе.
3.6. Разработка методики анализа полученных данных и расчёта констант взаимодействия лигандов с белком ионного канала.
|
| 4 |
1 января 2012 г.-15 июня 2012 г. |
Тестирование и доработка методики определения константы связывания ингибиторов ионных каналов на планшетном детекторе с использованием флуоресцирующего комплекса наночастица-нейротоксин. Оценка качества созданной методики. Разработка методического материала. |
| Результаты этапа: 4.1. Тестирование разработанной методики определения константы связывания с использованием нескольких синтетических блокаторов на модельном белке ионного канала.
4.2. Тестирование методики с использованием нескольких различных типов ионных каналов.
4.3. Анализ достоверности получаемых результатов.
4.4. Разработка рекомендаций по возможному использованию методики.
|
| 5 |
16 июня 2012 г.-28 ноября 2012 г. |
Проведение дополнительных исследований, обработка, обобщение и оценка результатов исследований. |
| Результаты этапа: .1. Проведение дополнительных исследований, в том числе патентных.
5.2. Оценка возможности создания конкурентоспособной продукции и разработка рекомендаций по использованию результатов проведенных НИР.
5.3. Анализ использования НИР и выработка рекомендаций по будущим НИР и ОКР.
5.4. Подготовка публикаций результатов.
5.5. Проведение технико-экономической оценки полученных результатов.
5.6. Проведение дополнительных исследований аналогичных методик оценки параметров взаимодействия лигандов с функциональными молекулами ионных каналов.
|
