![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Продолжить проведение комплекса работ по поддержанию коллекции штаммов-продуцентов Escherichia coli, содержащих плазмиды c генами WSCP, и осуществить наработку, препаративное выделение, очистку апобелков WSCP и сборку на их основе тетрамеров белков BoWSCP (класс IIa) и LvWSCP (класс IIb) со встроенными хромофорами для дальнейшего исследования физико-химических свойств тетрамерных хлорофиллл-содержащих комплексов белков семейства WSCP.
Chlorophyll-binding proteins of the WSCP (Water-Soluble Chlorophyll Binding Proteins) family from higher plants represent an ideal model system for studying the mechanism of photochemical reactions. We obtained data on the ability of WSCPs to photoinduce electron transfer reactions recently (Obukhov et al., 2023). We plan to continue carrying out a complex of works to maintain the collection of Escherichia coli producing strains containing plasmids with WSCP genes and to carry out the production, preparative isolation, purification of WSCP apoproteins and the assembly of WSCP tetramers with chromophores for further study of the WSCP family proteins physicochemical properties.
Обеспечить сохранность коллекции штаммов продуцентов E.coli, содержащих встроенные плазмиды с генами белков семейства WSCP, выделить с применением современных методик апобелки, провести самосборку и очистку холоформ WSCP, а также проверить качество выделенных препаратов электрофоретическими и спектральными методами.
Проведен детальный анализ литературы по данной тематике. Имеются генно-инженерные конструкции, содержащие гены белков WSCP. Отработаны варианты получения препаратов апобелков WSCP методом гетерологической экспрессии в штамме Escherichia coli BL21 (DE3), их очистки и самосборки с хлорофиллами. Налажена проверка чистоты и нативности препаратов. Этот комплексный подход обеспечивает необходимую базу для дальнейшего исследования физико-химических свойств белков этого уникального семейства. В частности, недавно нами получены данные о способности белков WSCP фотоиндуцировать реакции переноса электрона (Обухов и др., 2023).
Наработать индивидуальные белки WSCP и их хлорофилл-белковые комплексы в препаративных количествах, обеспечив нативность и чистоту препаратов, необходимые для дальнейшего изучения механизмов пигмент-белковых взаимодействий при активации антистрессовых систем растительной клетки.
средства ФИЦ Биотехнологии РАН в рамках гранта РНФ 21-74-20155 от 25.03.2021 |
# | Сроки | Название |
1 | 3 июля 2023 г.-31 октября 2023 г. | «Наработка методом гетерологичной экспрессии препаратов апобелков семейства WSCP и их водорастворимых комплексов с хлорофиллом» |
Результаты этапа: |
Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".