ИСТИНА

Разработка уточнений важнейших теоретических и прикладных проблем учения о фоновых и предопухолевых процессах и научное обоснование основных принципов совершенствования их дифференциальной диагностики при проведении патолого-анатомических исследований.

Goal. Development of clarifications of the most important theoretical and applied problems of the doctrine of background and precancerous processes and scientific substantiation of the basic principles of improving their differential diagnosis during pathological and anatomical studies. Research objectives: 1) Study of the morphogenesis of background processes. 2) Study of morphological features and immunophenotype of precancerous processes. 3) Study of molecular characteristics and prognostic potential of cancer stromal cells. 4) Study of the controllability of background and precancerous lesions from the standpoint of searching for the main directions of possible influence on the reduction of morbidity and mortality from neoplasms. Object of study. Biopsy (surgical) material for background, precancerous lesions and human tumors. Research methods: histological, immunohistochemical, molecular biological, statistical methods. Recommendations for implementing the results. The results obtained are recommended for implementation when conducting intravital pathological and anatomical studies of biopsy (operational) material in neoplasms of the stomach and colon, and can be used for postgraduate education of pathologists. Implementation level. The results were introduced into scientific and practical work in the Department of Clinical Pathology and the Pathological and Anatomical Department of the Lomonosov Moscow State University, in teaching the course of pathological anatomy and clinical pathological anatomy at the Faculty of Fundamental Medicine of the M.V. Lomonosov Moscow State University. Areas of use. 03.14.02 Pathological anatomy, 01.14.12 - Oncology. The economic efficiency of the results obtained was not evaluated, since this is an independent scientific task, the implementation of which is possible with the involvement of large data sets of long-term prognostic assessment, which will be done when the scientific group has the appropriate own materials. Forecast of the development of the topic. As a result of the work carried out, there is an obvious prospect in terms of the continuation of the begun studies of neoplasms of the stomach and colon. Taking into account the results obtained, in order to achieve the goal of the study, it is necessary to further study the molecular profile, immune microenvironment and search for new prognostic markers of tumors of the stomach and colon using the methods of "advanced" morphometry and statistical and mathematical analysis.

1) Будут установлены особенности экспрессии клаудина-3 в раке желудка и в прилежащей нормальной слизистой оболочке и будут установлены новые взаимосвязи уровня экспрессии с основными клинико-морфологическими характеристиками опухоли. 2) Будут установлены особенности экспрессии клаудина-4 в раке желудка и в прилежащей нормальной слизистой оболочке и будут установлены новые взаимосвязи уровня экспрессии с основными клинико-морфологическими характеристиками опухоли. 3) Будет разработан метод оценки иммунного микроокружения при раке желудка с применением системы автоматизированного морфометрического анализа и будет проведена сравнительная оценка чувствительности данного метода в отношении определения прогностических свойств рака желудка с чувствительностью общепринятого метода ручного подсчета иммунных клеток по «горячим точкам» инфильтрации. 4) Будут уточнены сведения о прогностическом значении иммунного микроокружения рака желудка и морфологически нормальной слизистой оболочки перитуморальной области с применением разработанного метода оценки иммунного микроокружения с применением автоматизированного морфометрического анализа. 5) Будет проведен подробный анализ значения опухоль-ассоциированных фибробластов в прогрессии злокачественных новообразований на основании данных мировой научной литературы. 6) Будет проведен подробный анализ и адаптацию к условиям использования в Российской Федерации новых классификаций ВОЗ доброкачественных и злокачественных опухолей толстой кишки; доброкачественных и злокачественных опухолей желудка (WHO Classification of Tumors. Digestive system tumors. 5th ed. IARC; 2019). 7) Будут установлены значимые особенности края пострезекционного дефекта после «холодной» полипэктомии эпителиального образования толстой кишки.

У научного коллектива существует большой опыт в исследовании опухолевых и предопухолевых процессов пищеварительного тракта. По результатам этих работ защищено 2 кандидатские диссертации (2017, 2018); опубликовано 74 статьи (в том числе 32 статьи в изданиях, индексируемых Scopus; 24 статьи в изданиях, индексируемых Web of Science; 48 статей в изданиях, индексируемых РИНЦ); 27 книг; 25 тезисов докладов; 27 доклада на конференциях. Коллективом проведено масштабное исследование зубчатых образований толстой кишки. По результатам анализа клинических и морфологических характеристик в объединенной группе CSL, включающей НР и SSA/P, установить достоверную границу невозможно в связи со сложностью взаимосвязей между морфологическими признаками и неравномерностью изменения морфологических характеристик в зависимости от выраженности расширения базальных отделов крипт. Коллективом проведено изучение свойств опухолевых стволовых клеток (CSC) при колоректальном раке. Оценен характер распределения и уровень маркера CSC (Msi-1) в аденокарциноме и полипах толстой кишки разных типов. Оценено состояние белков плотных контактов (клаудина-1, -3, -4) в аденокарциноме и полипах толстой кишки разных типов. Показана значимая разница между "зубчатыми образованиями" и "классическими аденомами" по локализации реакции Ki67 и его корреляции с локализацией мембранного CD44, что позволило сделать вывод о возможном развитии колоректального рака по обеим моделям канцерогенеза – восходящей и нисходящей – в зависимости от конкретного типа полипа. Таким образом, научный задел коллектива включает в себя следующие основные факторы: у коллектива имеется достаточная выборка случаев рака желудка (более 250 случаев) и колоректального рака (более 100 случаев); у коллектива имеется значительный опыт в исследовании опухолей пищеварительного тракта, что подтверждается списком публикаций руководителя и исполнителей проектов; у членов коллектива есть опыт работы с большими объемами статистических данных.

Основные предварительные результаты работы 4-го этапа работы (2020): 1. Установлено, что экспрессия клаудина-3 в раке желудка статистически значимо выше, чем в прилежащей нормальной слизистой оболочке (p<0,05). Отсутствие экспрессии клаудина-3 в раке желудка значимо ассоциировано с низкой степенью дифференцировки опухоли (p<0,05). В 69,6% случаев в раке желудка наблюдалась ядерная экспрессия клаудина-3, которая была ассоциирована с отсутствием мембранной экспрессии маркера (p<0,05). Впервые описана аномальная ядерная экспрессия клаудина-3 в раке желудка и установлена значимая ассоциация между наличием ядерной экспрессии и отсутствием типичной мембранной экспрессии маркера. Опубликована 1 статья в журнале, индексируемом базой данных Scopus. 2. Показано значимое различие экспрессии клаудина-4 между клетками аденокарциномы желудка и прилежащей нормальной слизистой оболочкой (p<0,05). Приведены сведения о возможной ассоциации повышенной экспрессии маркера в раке желудка с большими размерами опухоли. Клаудин-4 может рассматриваться в качестве потенциального прогностического маркера при раке желудка. Опубликована 1 статья в журнале, индексируемом базой данных RSCI Web of Science. 3. Разработан метод оценки иммунного микроокружения при раке желудка с применением системы автоматизированного морфометрического анализа. Преимущества метода: значительно меньшая трудоемкость (в 3-4 раза) по сравнению с ручными методами подсчета иммунных клеток; возможность анализа всей площади среза, а не отдельных полей зрения; высокая точность анализа вследствие использования автоматической сегментации по заданному цветовому диапазону. Установлено, что предложенный метод является более чувствительным в отношении определения прогностических свойств рака желудка по сравнению с общепринятым методом ручного подсчета иммунных клеток по «горячим точкам» инфильтрации. Отношение рисков (RR) для внутриопухолевых CD8 + клеток с использованием общепринятого метода подсчета по «горячим точкам» составило 1,001 (CI: 0,995–1,008, p <0,01), а при использовании новой шкалы RR=1,009 (CI: 0,532–1,914, p <0,01). При использовании общепринятого метода подсчета по «горячим точкам» полученное RR для CD8+ клеток в нормальной слизистой оболочке составило 1,005 (RR: 0,999–1,011, p <0,01), а при использовании нового метода RR=1,599 (RR: 0,519–4,917, p <0,01). Принят к печати абстракт в международном научном журнале, индексируемом базами данных Web of Science и Scopus. 4. Установлено, что высокая плотность инфильтрации CD8+ клетками в участках нормальной слизистой оболочки перитуморальной области наблюдалась в группах T4a и T4b по глубине инвазии (n=96, p=0,0089); была ассоциирована с наличием эмболов в лимфатических сосудах (n=96, p=0,0102) и с более продвинутой стадией рака желудка (n=96, p=0,0107). Впервые установлено, что средняя площадь CD8+ клеток в нормальной слизистой оболочке перитуморальной области является значимым отрицательным прогностическим фактором (RR=1,537; CI: 0,761–3,105; p<0,01), сопоставимым по степени ковариации со стадией опухолевого процесса. Аналогичный показатель, измеренный в центральной части опухоли не был значимо ассоциирован с выживаемостью пациентов (RR=0,803; CI: 0,574–1,122; p>0,05). Продемонстрирована возможность использования системы автоматического анализа для оценки иммунного микроокружения при раке желудка и установлено, что плотность инфильтрации CD8+ лимфоцитами морфологически нормальной слизистой оболочки перитуморальной области является независимым неблагоприятным прогностическим фактором, в связи с чем рекомендуется обязательный забор биопсийного материала из слизистой оболочки перитуморальной области на предоперационном этапе для морфометрической оценки инфильтрации CD8+ лимфоцитами. Установлено, что наибольшая плотность инфильтрации CD8+ лимфоцитами инвазивного края опухоли при раке желудка характерна для высокодифференцированных аденокарцином – G1 (медиана = 1274 кв. мкм) и умеренно дифференцированных аденокарцином – G2 (медиана = 1167 кв. мкм) и по сравнению с низкодифференцированными опухолями – G3 (медиана = 700 кв. мкм) и перстневидноклеточнымии раками – SRC (медиана = 493 кв. мкм). В соответствии с критерием Краскала-Уоллиса уровень значимости составил p = 0,0153. При анализе общей пятилетней выживаемости установлено, что высокая плотность инфильтрации морфологически нормальной ткани, непосредственно прилежащей к инвазивному краю опухоли (более 700 кв. мкм) ассоциирована с лучшей выживаемостью пациентов (критерий Кокса-Мантела; p = 0,036). Принята в печати статья в журнале, индексируемом базой данных Scopus (Характеристики иммунного микроокружения нормальной слизистой оболочки перитуморальной области – дополнительный независимый прогностический фактор при раке желудка / Данилова Н. В., Хомяков В. М., Чайка А. В., Михайлов И. А., Олейникова Н. А., Мальков П. Г. // Сибирский онкологический журнал); опубликован 1 тезис в материалах международной научной конференции. 5. Проведен подробный анализ значения опухоль-ассоциированных фибробластов в прогрессии злокачественных новообразований на основании данных мировой научной литературы. Опубликована 1 статья в журнале, индексируемом базой данных Scopus. Продолжается сбор и анализ материала рака толстой кишки для последующего изучения гетерогенности популяций опухоль-ассоциированных фибробластов при раке толстой кишки. 6. Проведена адаптация к условиям использования в Российской Федерации новых классификаций ВОЗ доброкачественных и злокачественных опухолей толстой кишки; доброкачественных и злокачественных опухолей желудка (WHO Classification of Tumors. Digestive system tumors. 5th ed. IARC; 2019). Опубликовано 3 статьи в журнале, индексируемом базой данных Scopus. 7. Получены новые данные к оценке края пострезекционного дефекта после «холодной» полипэктомии эпителиального образования толстой кишки (совместно с научной группой доктора мед. наук Федорова Е. Д.), позволяющие обеспечить надежную диагностику радикальности проведенного эндоскопического вмешательства и снижение частоты рецидива. Опубликованы 2 статьи из списка Web of Science Core Collection и 1 статья в журнале из списка ВАК.