Сравнительный анализ морфологических и молекулярно-филогенетических методов в систематике высших тефритоидных двукрылых (Diptera: Tephritoidea: Ulidiidae, Otitidae), разработка научных основ их диагностики.НИР

Соисполнители НИР

РФФИ Координатор

Источник финансирования НИР

грант РФФИ

Этапы НИР

# Сроки Название
1 1 января 2014 г.-31 декабря 2014 г. Сравнительный анализ морфологических и молекулярно-филогенетических методов в систематике высших тефритоидных двукрылых (Diptera: Tephritoidea: Ulidiidae, Otitidae), разработка научных основ их диагностики.
Результаты этапа: Цели В 2014 г планируется. Изучение коллекционного материала различных российских и зарубежных музеев, сбор свежего материала для морфологического и молекулярного анализа. Изучение тонкой морфологии методом СЭМ. Оценка различных признаков, потенциально перспективных для диагностики представителей семейств Ulidiidae и Otitidae. Подготовка рукописей не менее трех публикаций. Получение первых результатов по молекулярному анализу. Полученные в 2014 году важнейшие результаты Внешняя морфология изучена в том числе на тонком уровне с помощью методов СЭМ (сканирующей электронной микроскопии). У семейств Ulidiidae и Otitidae впервые были изучены такие тонкие детали морфологии как сенсорные поля на головной поверхности мух, в особенности в затылочной части; щетинки на лапках мух; щетинки и микроскульптура яйцекладов. Ранее некоторыми авторами выдвигалась идея о том, что сенсиллы на затылочной части и форма полей, где они располагаются могут быть систематически важными признаками. Мы показали что это не так и форма, размер и расположение щетинок варьируют внутри вида и не обнаружено закономерностей, как либо объединяющих виды в группы. Однако что касается щетинок и сенсилл и выростов на мембране яйцеклада, то здесь нами выявлены некоторые закономерности. На жестких участках яйцеклада обнаружены и щетинки и шипики. На мягкой выворачивающейся мембране яйцеклада обнаружены только микротрихии, или мембрана голая. Широкие конические микротрихии выявлены у Physiphora alceae (Preyssler, 1791), Homalocephala apicalis (Wahlb.), Ceroxys cinifera (Loew, 1846), Ceroxys munda (Loew, 1869), Seioptera vibrans (Linnaeus, 1758). Узкие конические сенсиллы характерны для представителей родов Timia и Ulidia. Голая мембрана была нами отмечена для видов: Euxesta pechumani Curran, 1938, Otites formosa (Panzer, 1798). Представители рода Melieria характеризуются микротрихиями специфической формы. Например, у Melieria omissa (Meigen, 1826) они специфической листовидной формы, а у Melieria crassipennis (Fabricius, 1794) – листовидной с крючками на вершине. Составлены таблицы для определения видов семейств Ulidiidae и Otitidae фауны России. Определитель по семейству Ulidiidae закончен, подготовлен к описанию 21 новый вид, сделаны иллюстрации внешнего вида и генитальных структур как новых так и старых видов, изучен весь имеющийся типовой материал (кроме утерянных типов). Таблица для определения семейства Otitidae готова, идет работа по описанию выявленных новых видов и подготовка иллюстраций. Описаны три новых вида (2 вида в роде Timia (Ulidiidae) и 1 вид в роде Melieria (Otitidae)) Ранее сданная в печать статья по ДНК-баркодингу мух сем. Ulidiidae перерабатывалась и уточнялась по рекомендациям рецензентов и в этом году была опубликована. Баркодинг Ulidiidae до нашей публикации не проводился. Продолжалось секвенирование участка митохондриальной ДНК – COI (658 п.н.). Для амплификации 18S были успешно опробованы праймеры Q5 (5′- GTA TCT GGT TGA TCC TGC CAG T-3′) и Q39 (5′- GAA TGA TCC WTC YGC AGG TTC-3′). В результате ПЦР целиком поднимается весь участок 18S ДНК (2000 п.н.). Для его прочтения необходимы праймеры 18-d3 (5′- TGG AGG GCA AGT CTG GTG -3′), 18-r5 (5′- TGG TGC CCT TCC GTC AAT -3′),18-d71 (5′- GTC CCT GCC CTT TGT ACA CAC -3′). Полученные сиквенсы показывают большую стабильность и удачно подходят для разделения крупных кластеров (родов, семейств). В надсем. Tephritoidea устойчивая кладистическая связь между Lenitovena (Tephritidae) и Adapsilia (Pyrgotidae), возможно, обусловлена тем, что первый из этих родов является наиболее примитивным среди мух-пестрокрылок. В итоге сем. Tephritidae представлено как парафилетическая группа. Интересные данные получены по сем. Platystomatidae. Оно распалось на два кластера с независимыми корнями. Означает ли это, что данное семейство является сборным—этот вопрос попытаемся прояснить в следующем году с привлечением дополнительного материала. Для внутривидовой (подвидовой и популяционной) изменчивости были подобраны праймеры для ПЦР участка ITS2: ITS2-dir (5′- aactgtgcgtcatcgtgtgaac -3′), ITS2-rev (5′- cctcaaccatatgtagtccaagcag -3′). Первые полученные результаты показали что этот участок, как мы и предполагали, характеризуется высоким инсерционно-делеционный полиморфизм (изменчивостью внутри популяции и внутри особи). С помощью программы «Champuru» для чтения гетерогенных сиквенсов нам удалось восстановить первичную структуру этих изменчивых участков без применения клонирования. Мы предполагаем, что различные популяции могут достоверно отличаться по спектрам вариантов строения ITS2.
2 1 января 2015 г.-31 декабря 2015 г. Сравнительный анализ морфологических и молекулярно-филогенетических методов в систематике высших тефритоидных двукрылых (Diptera: Tephritoidea: Ulidiidae, Otitidae), разработка научных основ их диагностики.
Результаты этапа: Завершены работы по секвенированию диптерологического материала по представителям семейств Ulidiidae и Otitidae. Подведены итоги сравнительного изучения гениталий заявленных семейств в виде исчерпывающего обзора. Подготовлены 3 статьи по морфологии и систематике, обзор по строению гениталий, 1 статья по результатам молекулярных исследований представителей заявленных в проекте семейств. Все статьи сданы в печать, 1 статья опубликована.

Прикрепленные к НИР результаты

Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".