ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Завершены и опубликованы в высокоимпактном журнале исследования по иммуногенности нового опухолеассоциированного аутоантигена TCP-1ζ у пациентов с новообразованиями щитовидной железы. Идентифицирован ряд новых аутоантигенов опухолей щитовидной железы, диагностическую ценность и молекулярные причины иммуногенности которых планируется изучить в рамках будущих исследований. Проведен in vivo и in vitro анализ мышей и первичных культур клеток линий cfKW/cfKW Nes-сre и cfKW/cfKW сre-ERT2, у которых экспрессия цитохрома с снижена и сопровождается аминокислотной заменой K72W. Было выявлено, что эффектом от такого сочетания у части мышей является аномальное развитие субвентрикулярной коры головного мозга и гидроцефалия, что вероятно связано с самой мутацией K72W на фоне ее эпистатических генов-модификаторов. Аномалий в функционировании иммунной системы не обнаружено. Показана продукция активных форм кислорода (АФК) целомоцитами морской звезды A. rubens уже после 10 минут инкубации с липополисахаридом. Проведено глубокое секвенирование транскриптома целомоцитов, активированных липополисахаридом. Получено 140 млн. пар чтений по 100 нуклеотидов с библиотек с кинетикой активации от 30 минут до 6 часов. На основе секвенирования 16S rRNA охарактирозован состав культивируемой микрофлоры. Из целомической полости культивируются в основном Oxalobacteraceae, не встречающиеся на внешних покровах морской звезды. Программируемая гибель клеток в эпидермисе из листьев гороха, вызванная цианидом и регистрируемая по разрушению клеточных ядер, предотвращалась детергентом тритоном Х-100 или при длительной преинкубации с Н2О2 в концентрации выше 0,3 мМ. Н2О2 без преинкубации, напротив, усиливал цианид-индуцированное разрушение ядер. Тритон Х-100 и Н2О2 вызывали нарушение барьера проницаемости плазматической мембраны. Локальное освещение хлоропластов устьичных клеток стимулировало образование АФК в соседних клетках устьиц, но не в основных эпидермальных клетках в эпидермисе листьев, что может свидетельствовать о распространении АФК через плазмодесмы.
госбюджет, раздел 0110 (для тем по госзаданию) |
# | Сроки | Название |
4 | 1 января 2014 г.-31 декабря 2014 г. | Иммунитет человека, животных и растений |
Результаты этапа: Продолжен анализ двух линий мышей, у которых десятикратно снижено количество цитохрома с в клетках иммунной системы: в макрофагах и в Т-клетках соответственно. Помимо того, что эти мыши имеют нормальное соотношение основных клеточных субтипов иммунной системы, нормальную активность дыхательной цепи и внутриклеточный уровень активных форм кислорода, оказалось, что цитохром-дефицитные клетки способны к нормальной поляризации в М1 и М2 подтипы, к нормальной продукции цитокинов и фагоцитозу. По всем указнным параметрам культуры цитохром-дефицитных клеток не отличались от контрольных. Было исследовано соотношение цитохром-дефицитных Т клеток и нормальных Т клеток в тимусе и селезенке, которое оказалось стабильным, что указывает на отсутствие дополнительной селекции для цитохром-дефицитных лимфоцитов и подчеркивает их функциональную полноценность. Была получена новая линия мышей, в которой снижение количества цитохрома с происходит генерализованно под действие тамоксифен-регулируемой рекомбиназы, однако и у таких мышей имунная система осталась без изменений. Результаты работа показывают значительную избыточность нативного количества цитохрома с в клетках иммунной системы и невозможность манипулировать ими при помощи регуляции экспрессии данного белка. Наблюдаемые различия в уровне индукции апоптоза между цитохром-дефицитными и контрольными макрофагами могут объясняться не эффектом снижения количества цитохрома с, а последствиями аминокислотной замены К72W. Изучен репертуар аутоантигенов, распознаваемых оксифильноклеточными опухолями щитовидной железы, выявлены новые аутоантительные биомаркеры злокачественных поражений ЩЖ. Изучен субпопуляционный состав лейкоцитарного инфильтрата одного из подтипов данных опухолей (Уортино-подобного рака ЩЖ), продемонстрирована олигоклональность плазматических клеток, являющихся доминирующей популяцией опухолеинфильтрирующих лимфоцитов в данном типе карцином ЩЖ. Для исследований было принято изучать образцы крови пациентов с положительными результатами антигенспецифической индукции интерферонагамма и фактора некроза опухолей. В подготовительной части исследования разрабатывались методы эффективного выделения микроРНК, а также разработаны комплекты праймеров и зондов для ПЦР типа stemloop на 5 микроРНК ( mir): mir29, mir155, mir191, mir93*, mir3125. Для всех синтезированы также копии микроРНК, т.е. контрольные образцы, на которых системы количественной realtime ПЦР хорошо работают. При этом, в отличие от публикаций, в которых изучали образцы плазмы этих пациентов мы исследовали минимальные объемы (0,1 0,2 мл) цельной крови, стабилизированной антикоагулянтами. Изучены пробы 26 пациентов, в основном подростки, из которых у 9 были локальные, ограниченные формы туберкулеза легких. По первым полученным данным, при активной ТБинфекции при пороговых циклах Сt для mir93* составляют 2224, а для здоровых (латентная инфекция) Ст mi93* 2526, т.е на порядок меньше. В настоящее время идет дальнейший набор материала. Известно, что нейтрофильные внеклеточные ловушки играют существенную роль в патогенезе ряда аутоиммунных и воспалительных заболеваний человека. Поскольку в подавляющем большинстве случаев образование ловушек или НЕТоз зависит от активных форм кислорода (АФК), то все вещества, способные подавлять или поглощать АФК, должны теоретически ингибировать АФК-зависимый НЕТоз. В связи с этим в работе была исследована способность ряда антиоксидантов подавлять АФК-зависимый НЕТоз первичных нейтрофилов человека в системе in vitro. Было показано, что антиоксиданты TEMPOL и Trolox дозозависимо подавляют АФК-зависимый НЕТоз, индуцированный форбол-миристат-ацететом, в то время как Tiron не оказывает на него какого-либо действия. Все исследованные вещества также дозозависимо снижали люминол- и люцигенин-зависимую хемилюминесценцию. Программируемая клеточная смерть (ПКС) у растений зависит от активных форм кислорода (АФК). Нами показана ПКС без АФК, вызываемая комбинацией CN– и Ag+, где Ag+ выполняет особую роль в качестве окислителя. Элиситоры патогенов (грибов, бактерий и вирусов) вызывают ПКС у растений, защитное действие от них оказывают митохондриально-направленные хиноны (SkQ – хиноны Скулачева). Проведен анализ действия SkQ на перенос электронов в хлоропластах и митохондриях растений. SkQ подавляет выделение О2 хлоропластами, вызывая переход нециклического переноса электронов в циклический режим. | ||
5 | 1 января 2015 г.-31 декабря 2015 г. | Иммунитет человека, животных и растений |
Результаты этапа: |
Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".