ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Стероидный гормон прогестерон регулирует разнообразные стороны репродуктивного процесса, включая поддержание иммунотолерантности плода по отношению к матери. Иммуномодулирующие функции прогестерона не ограничиваются фето-плацентарной системой. Транскрипционное действие прогестерона опосредуется ядерными рецепторами прогестерона (nPR) и считается классическим. Быстрые эффекты прогестерона опосредуются несколькими группами рецепторных белков, а именно, тремя видами мембранных рецепторов (mPRalpha, mPRbeta и mPRgamma) и компонентами мембранного рецептора прогестерона (PGRMC) а также ядерными рецепторами. В связи с тем, что мембранные рецепторы были идентифицированы недавно, механизмы их действия только начинают изучаться, однако совместная экспрессия nPR и mPR в большинстве тканей затрудняет исследования. На базе предварительных экспериментов по взаимодействию прегна-D’-пентаранов с разными типами рецепторов в институте органической химии РАН им.Н.Д.Зелинского созданы аналоги прогестерона с модифицированными функциональными группами колец A и D, предположительно снижающие их сродство к ядерному рецептору. Настоящим проектом предусматривается поиск избирательных лигандов mPR, не способных взаимодействовать с классическими nPR, и оценка возможности их иммуномодулирующего действия. В работе планируется: 1) получить два новых клона пекарских дрожжей, экспрессирующих mPRbeta и mPRgamma, соответственно, а также использовать уже имеющийся клон, трансформированный вектором с геном mPRalpha, и препарат ядерных рецепторов клеток матки; 2) протестировать взаимодействие синтезированных производных прогестерона с рецепторами указанных клонов и ядерными рецепторами матки радиолигандным методом с целью выявления производных с преимущественным сродством к mPR разного типа; 3) в иммунных клетках крови человека методом ОТ-ПЦР в реальном времени качественно и количественно определить спектр типов рецепторов прогестерона и возможность использования этих клеток в качестве модели для оценки мембранных эффектов прогестерона и его аналогов; 4) оценить влияние идентифицированных лигандов мембранных рецепторов разного типа на продукцию ряда цитокинов иммунными клетками крови человека. В результате работы ожидается обнаружить лиганды с предпочтительным сродством к мембранным рецепторам, и оценить их участие в модуляции функций иммунных клеток человека.
грант РФФИ |
# | Сроки | Название |
1 | 10 февраля 2014 г.-31 декабря 2014 г. | Поиск производных прогестерона, селективно взаимодействующих с его мембранными рецепторами и участвующих в регуляции активности иммунных клеток человека |
Результаты этапа: Были сконструированы дрожжевые векторы, несущие гены мембранных рецепторов прогестерона бета и гамма. Проведена отработка метода определения связывания и выбраны условия для дальнейшей работы. Определено сродство четырех впервые синтезированных производных прогестерона к мембранному рецептору альфа и ядерному рецептору. В мононуклеарных клетках человека качественно и количественно определена мРНК ядерного и трех изоформ мембранного рецептора прогестерона. | ||
2 | 1 января 2015 г.-31 декабря 2015 г. | Поиск производных прогестерона, селективно взаимодействующих с его мембранными рецепторами и участвующих в регуляции активности иммунных клеток человека |
Результаты этапа: |
Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".