ИСТИНА

Целью проекта является разработка методов ферментативного получения энантиомерно чистых тиолов и их применения в хиральном анализе. В части получения хиральных тиолов предполагаемое решение основывается на возможности хемо-, регио- и стереоселективного ферментативного ацилирования аминогрупп нуклуофила в присутствии других функциональных групп, в том числе амино- и сульфгидрильных групп, в молекулах субстратов под действием ацилаз. В части применения энантиомерно чистых тиолов в хиральном анализе, предполагаемое решение основывается на возможности регулирования хроматографического поведения аналитов и улучшения метрологических параметров метода определения энантиомеров первичных аминосоединений на основе высокоэффективной жидкостной хроматографии с предколоночной дериватизацией при рациональном выборе структуры тиола.

Разработан метод синтеза функционализированных энантиомерно чистых тиолов на основе реакции хемо- и стереоселективного ацилирования первичной аминогруппы аминотиолов, катализируемого пенициллинацилазой в 100% водной среде. В отличие от ферметативного ацилирования аминосоединений в органических растворителях, катализируемый пенициллинацилазой ацильный перенос функционализированных ацильных доноров на первичную аминогруппу аминотиолов претекает чрезвычайно быстро с высоким выходом целевого продукта, не затрагивает сульфгидрильную, гидрокси, фенольную, анилиновую, первичную и вторичную аминогруппы. Метод был разработан и оптимизирован для препаративного получения новых функционализированных энантиомерно чистых тиолов на основе детального изучения термодинамики и кинетики катализируемого пенициллинацилазой ферментативного ацилирования аминотиолов в водной среде. Полученные энантиомерно чистые тиолы были использованы в качестве модифицирующих реагентов для хирального анализа первичных аминосоединений методом ВЭЖХ с предколоночной дериватизацией. В сравнение с традиционными гомохиральными тиолами, новые полифункционализированные тиолы, содержащие дополнительные хиральный цетр, ионогенные группы, ароматические и полярные заместители являются более эффективными для хирального анализа: в случае их применения достигается более высокое разрешение образующихся диастереоизмоерных изоиндолов, расширяя тем самым область применения метода. Как было показано, применение новых хиральных тиолов позволяет анализировать различные классы первичных аминосоединений: аминокислоты, их производные и элементоорганические аналоги, аминоспирты, амины. Метод был апробирован при количественном определении энантиомеров первичных аминосоединений в индивидуальных вещества и многокомпонентных реакционных системах. Усовершенствованный метод позволил следить за превращением энантиомеров аминокислот, аминоспиртов и аминов в ходе их стереоселективного ферментативного превращения.