Аннотация:Время жизни и квантовый выход флуоресценции комплексов ФСII зависят от эффективности фотохимического и нефотохимического тушения. Фотохимическое тушение флуоресценции антенны ФСII осуществляется путем захвата возбуждений адаптированными к темноте [P680Qa] состояниями РЦ. При интенсивном импульсном возбуждении генерируются как заметное количество триплетных состояний каротиноидов в антенне, так и “закрытые” состояния РЦ [P680Qa+], которые являются нефотохимическими тушителями флуоресценции антенны. Общепринято считать, что эффективность тушения флуоресценции антенны состояниями реакционного центра [P680Qa] и [P680Qa+] идентична. В справедливости этой “догмы” усомнился Г. Ренгер, который показал, что константа скорости тушения флуоресценции состоянием [P680Qa+] в 2 раза больше константы скорости тушения состоянием [P680Qa]. К такому заключению он пришел при анализе изменения выхода флуоресценции обработанных гидрокисиламином мембранных фрагментов ФСII после 10 нс возбуждения на временной шкале 100 нс – 10 с. Оказалось, что для наилучшей аппроксимации экспериментальных данных необходимо предположить, что эффективность нефотохимического тушения флуоресценции антенны состоянием [P680Qa+] должна быть в 2 раза большей, чем тушение состоянием [P680Qa].
В данной работе мы в прямом эксперименте измерили константы скорости фотохимического kP680 и нефотохимического kP680+ тушения флуоресценции мембранных фрагментов (BBY частицы) фотосистемы II, а также кислородвыделяющих коровых частиц ФСII и коровых частиц, лишенных килородвыделяющего комплекса. В “темновом” состоянии РЦ измеряли кинетики затухания флуоресценции антенны при низкоинтенсивном возбуждении (=532 нм) и регистрации свечения с помощью электроннооптического преобразователя. Частота возбуждения образца составляла 1 Гц, в процессе измерения образец непрерывно премешивали. Для создания “закрытого” [P680Qa+] состояния РЦ было использовано высокоинтенсивное импульсное (=532 нм) предвозбуждение образца (накачка), опережающее на 8 нс измерительный импульс света. В этих условиях под действием импульса накачки в РЦ формировалось состояние [P680Qa+], после чего кинетика флуоресценции антенны измерялась с помощью пробного слабого пикосекундного импульса света, подаваемого на образец через 8 нс после импульса накачки. Оказалось, что эффективность тушения флуоресценции антенны фотоактивным пигментом РЦ в окисленном (P680+) состоянии в ~1.5 раза выше, чем эффективность тушения нейтральным (P680) состоянием РЦ.
Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований, грант № 14–04–01536.