Изучение каталитических свойств рекомбинантных β-лактамаз ТЕМ-1 и ТЕМ-171 молекулярного класса Астатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 19 июля 2016 г.
Аннотация:В работе были созданы штаммы-продуценты и получены гомогенные препараты рекомбинантных ферментов -лактамаз класса А TEM-1 и ТЕМ-171, отличающихся аминокислотной заменой валина в 84 положении на изолейцин (Val84Ile). Определены кинетические параметры -лактамазы ТЕМ-171 с использованием хромогенного субстрата CENTA (Km,каж=23 мкM, kкат=102 с-1). Установлен конкурентный тип ингибирования рекомбинантных -лактамаз ТЕМ-1 и ТЕМ-171 тазобактамом; значения констант ингибирования в реакции гидролиза субстрата CENTA составили 0,057 и 0,047 мкM для ТЕМ-1 и ТЕМ-171, соответственно. Показано, что мутация (Val84Ile) приводит к уменьшению стабильности фермента ТЕМ-171 в 1,5 раза.