Механизмы дедифференцировки клеток ретинального пигментного эпителия глаза взрослого человека in vitro: морфологический и молекулярно-генетический анализстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Аннотация:Изменение морфологии и молекулярно-генетического профиля клеток ретинального пигментного эпителия (РПЭ) человека in vitro изучали при воздействии основного фактора роста фибробластов (оФРФ). Морфологию клеток оценивали по параметрам площади и периметра клетки, коэффициентам распластывания и поляризации. Показано, что через 48 ч после добавления фактора в культуре увеличивалось число клеток вытянутой (фибробластоподобной) формы и увеличивалось число клеток, размер которых был меньше, чем в контроле. Одновременно снижалась пролиферативная активность клеток, что было определено в МТТ-тесте. Иммуноцитохимический анализ показал снижение окрашивания на Cx43 и усиление интенсивности окрашивания на OTX2. Одновременно увеличивалось количество нестин-позитивных клеток и краткосрочно βIII-тубулин-позитивных клеток. Методом количественной ПЦР в реальном времени в клетках РПЭ, обработанных оФРФ, выявлено увеличение уровней экспрессии мРНК генов KLF4, OCT4, NANOG, OTX2 и NES, при совместном понижении уровней мРНК генов MITF, KRT18, что свидетельствует об усилении дедифференцировки. Эти данные подтверждаются снижением уровня экспрессии мРНК COL1A1, указывающего на понижении синтетической активности клеток. Результаты свидетельствуют, что однократное (кратковременное) воздействие оФРФ является достаточным для активации механизма, понижающего уровень дифференцировки клеток в сторону нейроэпителия.