Флуоресцентные свойства и состав флуорофоров липофусциновых гранул ретинального пигментного эпителия кадаверных глаз человека в норме и в случае визуализируемой патологиитезисы доклада
Аннотация:В настоящее время активно развивается новый неинвазивный метод диагностики глазной патологии – аутофлуоресценция глазного дна. Основным источником аутофлуоресценции являются липофусциновые гранулы (ЛГ), находящиеся в клетках ретинального пигментного эпителия (РПЭ). Флуоресцентные свойства ЛГ обусловлены наличием в них более 21 флуорофора – производных полностью-транс-ретиналя. Структура большей части флуорофоров еще не установлена. Наиболее изученным является флуорофор ЛГ – бис-ретинилиден этаноламин (А2Е). Относительный состав флуорофоров в ЛГ меняется с возрастом, и, вероятно, при патологии.
Целью данной работы был анализ спектральных характеристик суспензии клеток РПЭ и состава флуорофоров ЛГ, выделенных из индивидуальных кадаверных глаз в норме и в случае визуализируемой патологии.
Флуорофоры ЛГ были выделены из РПЭ кадаверных глаз доноров разных возрастов как в норме, так и в случае визуализируемой патологии. Кадаверные глаза человека были получены из Глазного тканевого банка ФГБУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России. Экстрагированные в хлороформ флуорофоры ЛГ были исследованы методами флуоресцентной спектроскопии и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Показано, что максимумы спектров флуоресценции суспензии клеток РПЭ из кадаверных глаз человека в норме не меняются с возрастом и находятся в области 575 ± 15 нм. При этом в случае визуализированной патологии максимум спектров флуоресценции суспензии клеток РПЭ смещается в коротковолновую область видимого спектра на 23-36 нм. Обнаружено, что с возрастом в составе ЛГ повышается относительное содержание продуктов фотоокисления и фотодеградации А2Е (A2Eox,deg). Соотношение A2Eox,deg/A2E увеличивается с возрастом доноров от 0,64±0,03 до 1,31±0,04. Сравнение индивидуальных РПЭ, выделенных из кадаверных глаз доноров близких по возрасту, но отличающихся наличием или отсутствием в РПЭ визуально наблюдаемых патологических изменений показало, что при патологии наблюдается повышенное относительное содержание А2Е и продуктов его (фото)окисления и деградации. Полученные данные могут быть полезны для усовершенствования метода аутофлуоресценции глазного дна.