Нейропротекторное действие карнозина на первичную культуру клеток мозжечка крысы в условиях окислительного стресса

Лопачев, А.В.; Лопачева, О.М.; Абаимов, Д.А.; Королева, О.В.; Владыченская, Е.А.; Ерухимович, А.А.; Федорова, Т.Н.

Авторы: Лопачев А.В., Лопачева О.М., Абаимов Д.А., Королева О.В., Владыченская Е.А., Ерухимович А.А., Федорова Т.Н.
Журнал: Биохимия
Том: 81
Номер: 5
Год издания: 2016
Издательство: ФГБУ "Издательство "Наука"
Местоположение издательства: Москва
Первая страница: 678
Последняя страница: 689
Аннотация: Дипептид карнозин (β-аланил-L-гистидин) является природным антиоксидантом, однако его протекторное действие в условиях индукции окислительного стресса нейротоксинами недостаточно изучено. В работе показан нейропротекторный эффект карнозина на первичной культуре клеток мозжечка крысы при индукции окислительного стресса 1 мМ 2,2′-азобис(2-метилпропионамидин)дигидрохлоридом (AAPH), связанной с непосредственным образованием свободных радикалов во внеклеточной среде и внутри клеток, и 20 нМ ротеноном, вызывающим увеличение количества внутриклеточных активных форм кислорода (АФК). В обеих моделях внесение в инкубационную среду 2 мМ карнозина снижало гибель клеток, рассчитанную при помощи флуоресцентной микроскопии, и повышало их жизнеспособность, оцененную по МТТ-тесту. Антиоксидантное действие карнозина внутри клеток культуры было продемонстрировано с использованием флуоресцентного зонда дихлорфлуоресцеина (DCF). Карнозин в 2 раза снижал вызванный 20 нМ ротеноном рост количества АФК в нейронах. С использованием метода железоиндуцированной хемилюминесценции было показано, что преинкубация первичной культуры нейронов с 2 мМ карнозином предотвращала снижение эндогенного антиоксидантного потенциала клеток, вызванное 1 мМ AAPH и 20 нМ ротеноном. Методом жидкостной хромато-масс-спектрометрии выявлено, что 10-минутная инкубация культуры нейронов с 2 мМ карнозином приводит к повышению содержания карнозина в клеточных лизатах в 14,5 раз. Таким образом, карнозин способен проникать внутрь нейронов и оказывать антиоксидантное действие. Методом вестерн-блоттинга было показано наличие переносчика пептидов PEPT2 в клетках мозжечка крыс, что свидетельствует о возможности транспорта карнозина внутрь клеток. В то же время методом вестерн-блоттинга не было обнаружено изменений в уровне белков-регуляторов апоптоза семейства Bcl-2 и фосфорилировании MAP-киназ при действии карнозина, что позволяет предположить, что побочное действие карнозина на системы контроля пролиферации и апоптоза в здоровых клетках могло бы быть минимальным или отсутствовать вовсе.
Добавил в систему: Лопачева Ольга Михайловна

	ИСТИНА	Войти в систему Регистрация
	ИСТИНА ИНХС РАН
	Главная Поиск Статистика О проекте Помощь

ИСТИНА

ИСТИНА ИНХС РАН

Нейропротекторное действие карнозина на первичную культуру клеток мозжечка крысы в условиях окислительного стрессастатья

Прикрепленные файлы