ВИЗУАЛИЗАЦИЯ КОНЪЮГАТОВ НАНОЧАСТИЦ АЛМАЗА С ТЕТРАКАРБОКСИФЕНИЛПОРФИРИНОМ В МАКРОФАГАХ ЛИНИИ THP-1

Ерохина, М.В.; Масютин, А.Г.; Онищенко, Г.Е.; Трофимов, А.В.; Зак, П.П.; Трофимова, Н.; Цаплев, Ю.Б.; Лапина, В.А.; Павич, А.; Першукевич, П.П.

Авторы: Ерохина М.В., Масютин А.Г., Онищенко Г.Е., Трофимов А.В., Зак П.П., Трофимова Н., Цаплев Ю.Б., Лапина В.А., Павич А., Першукевич П.П.
Сборник: VI Съезд биофизиков России, г. Сочи, 16-21 сентября, 2019
Том: 1
Тезисы
Год издания: 2019
Место издания: OOO Полиграфическое объединение "Плехановец" Кубанский государственный университет Краснодар
Первая страница: 250
Последняя страница: 251
DOI: 10.31429/SbR6.2019.001
Аннотация: Среди материалов, разрабатываемых для медицинских целей, следует выделить материалы с оптически управляемыми свойствами на основе углеродных наночастиц, в том числе, наноалмазов детонационного синтеза. Свойства наноалмазов детонационного происхождения представляют значительный интерес из-за их доступности и перспектив использования. Наноалмазные частицы обладают лабильной поверхностью и легко функционализируются, что позволяет создавать комплексные наночастицы под различные задачи. Вышеуказанное позволяет рассматривать наноалмазы в качестве перспективных материалов для биомедицинских исследований. В настоящей работе представлены модельные исследования комплексов наноалмазов с тетракарбоксифенилпорфирином (TCPP) в качестве люминесцирующего агента. Целью настоящего исследования было дать характеристику исследуемых наночастиц, а также визуализировать их в макрофагальных клетках человека линии THP-1. Синтез наноалмазных комплексов тетракарбоксифенилпорфирина осуществлялся c использованием ультрадисперсных синтетических алмазов марки “УДА-СП” НП ЗАО “Синта” (Минск, Беларусь). Для характеристики наноалмазов и их внутриклеточной визуализации использовали методы традиционной и аналитической трансмиссионной электронной микроскопии, а также лазерной сканирующей конфокальной микроскопии (ЛСКМ). Образцы наноалмазных частиц представляют собой порошки серого цвета, отдельные наночастицы имеют размер от 4 до 25 нм в диаметре. В воде наночастицы формируют неустойчивую суспензию и оседают примерно через 5 минут после суспендирования. Также алмазные наночастицы могут образовывать агрегаты. Методом дифракции электронов получены данные о кристаллической структуре наноалмазов, что позволило в дальнейшем идентифицировать их в клетках THP-1. Клеточная культура ТНР-1 – суспензионная культура, использующаяся для моделирования процессов фагоцитоза. Добавление форболового эфира к суспензии клеток в итоговой концентрации 100 нМ индуцирует макрофагальную дифференцировку, клетки прикрепляются к субстрату, распластываются и формируют отростки. На третьи сутки дифференцировки в культуральную среду добавляли суспензию наноалмазов (50 мкг/мл). Через 24 часа инкубации клетки отмывали и фиксировали для дальнейших исследований при помощи электронной микроскопии и ЛСКМ. Было показано, что клетки активно поглощают наноалмазные комплексы, которые выявляются в эндосомах размером до 5 мкм. Также скопления наночастиц были визуализированы в клетках с помощью ЛСКМ в канале Qdot655 (Olympus, Япония). Таким образом, можно сделать вывод, что наноалмазный комплекс TCPP хорошо сохраняет свою кристаллическую структуру и люминисцентные свойства при поглощении клетками. Это позволяет в дальнейшем визуализировать данные наночастицы методами как электронной микроскопии, так и ЛСКМ. Интенсивное поглощение изученных в настоящей работе нанокомплексов клетками, и их эффективная визуализация внутри клеток, говорят о том, что такие комплексы возможно использовать для переноса в клетки фотоуправляемых агентов, включая терапевтические, а также для изучения локализации таких комплексов во внутриклеточных компартментах. Работа выполнена при финансовой поддержке гранта РФФИ № 18-53-00038.
Добавил в систему: Ерохина Мария Владиславовна

	ИСТИНА	Войти в систему Регистрация
	ИСТИНА ИНХС РАН
	Главная Поиск Статистика О проекте Помощь

ИСТИНА

ИСТИНА ИНХС РАН

ВИЗУАЛИЗАЦИЯ КОНЪЮГАТОВ НАНОЧАСТИЦ АЛМАЗА С ТЕТРАКАРБОКСИФЕНИЛПОРФИРИНОМ В МАКРОФАГАХ ЛИНИИ THP-1тезисы доклада

Прикрепленные файлы