Определение кинетических параметров оксидазы D-аминокислот дрожжей дикого типа и ее мутантов в реакции окисления цефалоспорина С

Атрошенко, Д.Л.; Пометун, А.А.; Савин, С.С.; Тишков, В.И.

Авторы: Атрошенко Д.Л., Пометун А.А., Савин С.С., Тишков В.И.
Журнал: Вестник Московского университета. Серия 2: Химия
Том: 60
Номер: 4
Год издания: 2019
Издательство: Издательский дом МГУ
Местоположение издательства: Москва
Первая страница: 226
Последняя страница: 231
Аннотация: Окисление цефалоспорина С (CPC ) оксидазой D-аминокислот является первой стадией промышленного процесса биокаталитического производства 7-аминоцефалоспорановой кислоты – исходного синтона получения полусинтетических цефалоспориновых антибиотиков. Нами проведено определение кинетических параметров – каталитической константы и константы Михаэлиса, из зависимости начальной скорости реакции от концентрации СРС (метод начальных скоростей) для рекомбинантной оксидазы дрожжей Trigonopsis variabilis (TvDAAO) дикого типа и ее трех мутантных форм с точечными заменами остатка Met на остаток Leu в положениях 104, 156 и 209, а также четверного мутанта TvDAAO RDAF. Показано, что у точечных мутантов введенные замены в первую очередь приводят к уменьшению константы Михаэлиса. Наибольшее увеличение каталитической эффективности kcat/KM - 39%, наблюдалось для мутанта с заменой Met156Leu. В случае четверного мутанта константа Михаэлиса с СРС по сравнению с ферментом дикого типа возросла в 4 раза, но каталитическая эффективность практически не изменилась за счет 4-хкратного увеличения каталитической константы.
Добавил в систему: Тишков Владимир Иванович

	ИСТИНА	Войти в систему Регистрация
	ИСТИНА ИНХС РАН
	Главная Поиск Статистика О проекте Помощь

ИСТИНА

ИСТИНА ИНХС РАН

Определение кинетических параметров оксидазы D-аминокислот дрожжей дикого типа и ее мутантов в реакции окисления цефалоспорина Сстатья

Прикрепленные файлы