Catalytic asymmetry in homodimeric H+‐pumping membrane pyrophosphatase demonstrated by non‐hydrolyzable pyrophosphate analogs

Anashkin, V.A.; Malinen, A.M.; Bogachev, A.V.; Baykov, A.A.

Авторы: Anashkin V.A., Malinen A.M., Bogachev A.V., Baykov A.A.
Журнал: International Journal of Molecular Sciences
Том: 22
Номер: 18
Год издания: 2021
Издательство: MDPI
Местоположение издательства: Basel, Switzerland
Первая страница: 1
Последняя страница: 18
Номер статьи: 9820
DOI: 10.3390/ijms22189820
Аннотация: С помощью усовершенствованного метода измерения активности исследовано ингибирование К+-зависимой Н+-транспортирующей мембранной пирофосфатазы (мРРазы) из Desulfitobacterium hafniensee тремя негидролизуемыми аналогами пирофофосфата (имидодифосфатом и С-замещенными бисфосфонатами). Кинетические данные обнаружили отрицательную кооперативность связывания ингибиторов с двумя активными центрами и пониженную скорость превращения при наличии субстрата или ингибитора в соседней субъединице. Неэквивалентность активных центров в гидролизе пирофосфата (различие величин Км) исчезало при низкой концентрации Mg2+ (необходимого кофактора). Замена К+, второго кофактора, на Na+ увеличивала кооперативность связывания. Аналогичная неэквивалентность наблюдалась и для фермента, солюбилизированного действием детергента. Полученные данные показывают, что механизм действия мРРазы в транспорте катионов через мембрану объединяет принцип прямого сопряжения Митчелла с конформационным сопряжением.
Добавил в систему: Байков Александр Андреевич

	ИСТИНА	Войти в систему Регистрация
	ИСТИНА ИНХС РАН
	Главная Поиск Статистика О проекте Помощь

ИСТИНА

ИСТИНА ИНХС РАН

Catalytic asymmetry in homodimeric H+‐pumping membrane pyrophosphatase demonstrated by non‐hydrolyzable pyrophosphate analogsстатья Исследовательская статья