ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ НОХ В ЛЕЙКОЗНЫХ ЛИНИЯХ ПРЕДШЕСТВЕННИКОВ В-КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА, ЭКСПРЕССИРУЮЩИХ ОНКОГЕН E2A-PBX1

Шестакова, Е.А.

Автор: Шестакова Е.А.
Журнал: Российский биотерапевтический журнал
Том: 19
Номер: 1
Год издания: 2020
Издательство: Изд. группа РОНЦ
Местоположение издательства: М.
Первая страница: 89
Последняя страница: 95
DOI: 10.17650/1726
Аннотация: Введение. Острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ) диагностируется в основном у детей и подростков (2 / 3 заболевших), что де-лает его одним из самых распространенных детских онкологических заболеваний. В развитии ОЛЛ участвуют онкогены,в частности продукт транслокации хромосом 1 и 19 онкоген E2A-PBX1, кодирующий химерный белок E2A-PBX1, являющий-ся сильным транскрипционным активатором, а также онкогены семейства НОХ, в основном кластеры генов HOXA и НОХВ.Химерный белок E2A-PBX1 и белки НОХА, относящиеся к семейству белков, содержащих гомеодомен, образуют in vivo ком-плексы с факторами, эпигенетически регулирующими экспрессию генов и включающими в себя модифицирующие и ремодели-рующие хроматин ферменты, что в значительной мере обусловливает их онкогенные свойства. В предыдущих исследованияхнами были получены данные о генетических взаимодействиях генов E2A-PBX1 и НОХ, участвующих в развитии лейкозов.Цель исследования – подтвердить роль онкогена Е2А-РВХ1 в активации экспрессии кластера генов НОХА, белковые продук-ты которых также обладают высоким онкогенным потенциалом.Материалы и методы. В работе были использованы 4 лейкозные линии предшественников В-клеток (пре-В) человека: RCH-ACV,KASUMI-2, 697 и NALM-6. Для идентификации продукта транслокации хромосом 1 и 19 онкогена E2A-PBX1 и его экспрессиииспользовали метод стандартной полимеразной цепной реакции. Для определения экспрессии 11 генов НОХ кластера А (геновНОХА) применяли метод обратной транскрипции, сопряженной с количественной полимеразной цепной реакцией в реальномвремени.Результаты. Продемонстрировано, что онкоген E2A-PBX1 содержится и экспрессируется в 3 исследованных лейкозныхлиниях пре-В-клеток человека (RCH-ACV, KASUMI-2 и 697) и отсутствует в линии клеток NALM-6. Показано, что в кле-точных линиях RCH-ACV, KASUMI-2, 697, которые содержат в своем геноме онкоген E2A-PBX1, 7 из 11 генов кластера HOXАэкспрессируются на высоком уровне. В отличие от этих 3 клеточных линий, экспрессирующих большинство генов кластераHOXА, в линии клеток NALM-6, не экспрессирующих онкоген E2A-PBX1, используемой в качестве контроля, экспрессия геновНОХА не наблюдается, за исключением малой экспрессии 2 генов этого кластера.Выводы. В данном исследовании продемонстрировано, что лейкозные линии пре-В-клеток человека RCH-ACV, KASUMI-2и 697, содержащие и экспрессирующие онкоген Е2А-РВХ1, экспрессируют также большинство (7 из 11) генов НОХА на вы-соком уровне, в отличие от контрольной клеточной линии NALM-6, не содержащей онкогена Е2А-РВХ1 и почти не экспрес-сирующей гены НОХА. Таким образом, полученные результаты предполагают участие сильного транскрипционного актива-тора – химерного белка Е2А-РВХ1, ассоциированного с факторами, модифицирующими и ремоделирующими хроматин,в активации экспрессии кластера генов НОХА, также имеющих высокий онкогенный потенциал.Ключевые слова: онкоген Е2А-РВХ1, кластер генов НОХА, лейкозные клеточные линии RCH-ACV, KASUMI-2, 697 и NALM-6,количественная полимеразная цепная реакция в реальном времени, ассоциированная с обратной транскрипциейHOX GENE EXPRESSION IN HUMAN B-CELL PROGENITOR LEUKEMIA CELL LINESEXPRESSING E2A-PBX1 ONCOGENEE. A. ShestakovaN. N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology of the Ministry of Health of the Russian Federation;24 Kashirskoye Shosse, Moscow 115478, RussiaIntroduction. Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is diagnosed mainly in children (2 / 3 of diseases) making this type of leukemia oneof the most common oncological diseases among children. Oncogenes are involved in the development of ALL, in particular the productof chromosomes 1 and 19 translocation, the oncogene E2A-PBX1 that codes for E2A-PBX1 chimeric oncoprotein with strong transcriptionactivation properties as well as oncogenes of HOX family, mainly HOXA and HOXB cluster genes. E2A-PBX1 chimeric oncoproteinand НОХА proteins are associated in vivo with factors participating in epigenetic regulation of gene expression such as chromatin modifyingand remodeling enzymes that partially determines their oncogenic properties. In previous studies we obtained data indicating geneticinteractions of E2A-PBX1 and НОХ genes participating in leukemia development.The aim of this research was to confirm the role of Е2А – РВХ1 oncogene in the activation of the expression of НОХА cluster genes codingfor the proteins with high oncogenic potential.Materials and methods. The objects of the study were four B cell progenitor (pre-B) leukemia cell lines: RCH-ACV, KASUMI-2, 697and NALM-6. Standard polymerase chain reaction (PCR) was used for the identification of chromosome 1 and 19 translocation product,E2A-PBX1 oncogene and its expression. Method of reverse transcription coupled with quantitative polymerase chain reaction (Q-RT-PCR)was used for the analysis of 11 HOXA cluster genes expression.Results. It is demonstrated that E2A-PBX1 oncogene is present and expressed in three studied human pre-B leukemia cell lines, RCH-ACV,KASUMI-2 and 697, while its expression is absent in NALM-6 cell line. High expression of 7 from 11 HOXА cluster genes is revealedin RCH-ACV, KASUMI-2 and 697 cell lines expressing E2A-PBX1 oncogene, whereas NALM-6 cell line, that does not express E2A-PBX1oncogene, also does not express HOXA genes except low expression of two genes from this cluster.Conclusions. The data obtained in this study demonstrate that RCH-ACV, KASUMI-2 and 697 human leukemia pre-B cell lines, containingand expressing Е2А-РВХ1 oncogene, also express most of HOXA genes (7 genes of 11 genes) at high level in contrast to controlNALM-6 cell line that does not comprise Е2А-РВХ1 oncogene and almost does not express НОХА genes. Therefore, the results of thisstudy suggest the participation of strong transcriptional activator, chimeric oncoprotein Е2А-РВХ1, associated with chromatin modifyingand remodeling enzymes, in the expression activation of HOXA cluster genes that also possess high oncogenic potential.Key words: E2A-PBX1 oncogene, HOXA gene cluster, RCH-ACV, KASUMI-2, 697 and NALM-6 leukemia cell lines, reverse transcription– quantitative polymerase chain reaction
Добавил в систему: Шестакова Елена Анатольевна

	ИСТИНА	Войти в систему Регистрация
	ИСТИНА ИНХС РАН
	Главная Поиск Статистика О проекте Помощь

ИСТИНА

ИСТИНА ИНХС РАН

ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ НОХ В ЛЕЙКОЗНЫХ ЛИНИЯХ ПРЕДШЕСТВЕННИКОВ В-КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА, ЭКСПРЕССИРУЮЩИХ ОНКОГЕН E2A-PBX1статья Исследовательская статья

Прикрепленные файлы