|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Гликопротеин KPILP Nicotiana benthamiana возвращается в клетку после секреции в апопластстатья
- Авторы: Апель П.А., Ершова Н.М., Камарова К.А., Шешукова Е.В., Комарова Т.В.
- Сборник: III ОБЪЕДИНЕННЫЙ НАУЧНЫЙ ФОРУМ ФИЗИОЛОГОВ, БИОХИМИКОВ И МОЛЕКУЛЯРНЫХ БИОЛОГОВ; VII СЪЕЗД БИОХИМИКОВ РОССИИ; X РОССИЙСКИЙ СИМПОЗИУМ «БЕЛКИ И ПЕПТИДЫ»; VII СЪЕЗД ФИЗИОЛОГОВ СНГ. НАУЧНЫЕ ТРУДЫ
- Том: 2
- Год издания: 2021
- Место издания: Перо Москва
- Первая страница: 72
- Последняя страница: 73
- Аннотация: Скоординированная и генерализованная реакция растений на неблагоприятные факторы окружающей среды сопровождается активацией как апопластного, так и симпластного транспорта макромолекул. При этом внутриклеточный транспорт секретируемых белков с участием эндоплазматического ретикулума (ЭР) и аппарата Гольджи (АГ) играет немаловажную роль. Обычно секреторные белки с N-концевым сигнальным пептидом направляются через ЭР/АГ в апопласт. Проходя через АГ, белки могут гликозилироваться. Мы идентифицировали стресс-индуцируемый белок KPILP (Kunitz protease inhibitor like protein) в растениях Nicotiana benthamiana, и установили, что он содержит сигнальный пептид, который направляет его в ЭР и АГ. Однако, вопреки ожиданиям, KPILP, слитый с GFP, локализуется не в апопласте, а внутри клетки, образуя точечные структуры по периферии. Целью данной работы было исследовать путь внутриклеточного транспорта KPILP и определить его конечную локализацию. Мы предположили, что KPILP может выходить в апопласт, но затем возвращаться обратно в клетку при участии эндоцитоза. Для проверки этого предположения мы использовали технику ингибирования эндоцитоза с помощью С-концевого фрагмента тяжелой цепи клатрина (Hub1). При одновременном синтезе KPILP:GFP и RFP:Hub1 в клетках мы наблюдали ожидаемую для секретируемого белка апопластную локализацию KPILP:GFP. Ранее мы показали, что KPILP содержит 3 сайта N-гликозилирования. Введение мутаций в эти сайты практически не влияет на паттерн распределения белка в клетке, тем не менее при блокировании эндоцитоза эти формы ведут себя по-разному. Для корректного внутриклеточного транспорта KPILP и его созревания необходимо наличие сигнального пептида, направляющего белок в ЭР/АГ, гликозилирование по остаткам Asn60 и Asn86, секреция и эндоцитоз по клатрин-зависимому пути.
- Добавил в систему: Комарова Татьяна Валерьевна