Целлюлазный комплекс гриба Chrysosporium lucknowense: выделение и характеристика эндоглюканаз и целлобиогидролазстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Информация о цитировании статьи получена из
Scopus
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 24 января 2020 г.
Аннотация:С помощью различных видов хроматографии из культуральной жидкости мутантного штамма Chrysosporium lucknowense выделены восемь целлюлолитических ферментов: шесть эндоглюканаз (ЭГ) с молекулярными массами 25 (pI 4,0), 28 (pI 5,7), 44 (pI 6,0), 47 (pI 5,7), 51 (pI 4,8) и 60 кДа (pI 3,7) и две целлобиогидролазы – ЦБГI (65 кДа, pI 4,5) и ЦБГII (43 кДа, pI 4,2). Для некоторых из выделенных целлюлаз установлена их принадлежность к известным семьям гликозид-гидролаз: Cel6A (ЦБГII), Cel7A (ЦБГI), Cel12A (ЭГ28), Cel45A (ЭГ25). Показано, что ЭГ44 и ЭГ51 – это две формы одного фермента, причем ЭГ44, по-видимому, является каталитическим модулем полноразмерной ЭГ51 без целлюлозосвязывающего модуля. Все ферменты имеют рН-оптимум активности в кислой среде (при рН 4,5–6,0), ЭГ25 и ЭГ47 сохраняют 55–60% активности при рН 8,5. Определена субстратная специфичность выделенных целлюлаз – по карбоксиметилцеллюлозе, β-глюкану, авицелу, ксилану, ксилоглюкану, ламинарину, п-нитрофенил-β-D-целлобиозиду. Среди эндоглюканаз наибольшей удельной карбоксиметилцеллюлазной активностью обладали ЭГ44 и ЭГ51 (59 и 52 ед/мг), наименьшей (11 ед/мг) – ЭГ28, однако она проявляла крайне высокую активность по β-глюкану (125 ед/мг). Только ЭГ51 и ЦБГI характеризовались высокой адсорбционной способностью на авицеле (98–99%). Изучена кинетика гидролиза авицела под действием выделенных ферментов в присутствии очищенной β-глюкозидазы из Aspergillus japonicus. По выходу глюкозы через 7 сут. гидролиза эффективность действия ферментов уменьшалась в ряду: ЦБГI, ЭГ60, ЦБГII, ЭГ51, ЭГ47, ЭГ25, ЭГ28, ЭГ44.