|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Выявление вируса папилломы человека в образцах рака мочевого пузырятезисы доклада
- Авторы: Трофимова О.Б., Куевда Д.А., Волгарева Г.М., Шипулина О.Ю., Головина Д.А., Глазунова В.А., Ермилова В.Д.
- Сборник: Материалы I Всероссийского ежегодного конгресса по инфекционным болезням
- Тезисы
- Год издания: 2009
- Издательство: МИИ
- Местоположение издательства: Москва
- Первая страница: 211
- Последняя страница: 211
- Аннотация: Роль вируса папилломы человека (ВПЧ) в этиологии и патогенезе рака мочевого пузыря (РМП) на сегодняшний день является дискутабельным вопросом. Для изучения вопроса причастности ВПЧ к онкогенезу в МП необходимо подтвердить присутствие вируса в образцах биоптатов МП, поскольку существует вероятность контаминации препаратов при проведении операции. Цель работы разработка схемы тестирования биоптатов МП и разработка методов для его проведения. Материалы и методы. Экстракция нуклеиновых кислот проводилась из биоптатов РМП полученных при трансуретральной резекции. Экстракция ДНК проводилась по методу R. Boom с использованием набора «ДНК-сорб-С» ФГУН «ЦНИИЭ», экстракция РНК проводилась по методу Хомчинского с использованием набора «РИБО-золь-В» ФГУН «ЦНИИЭ». Определение наличия ВПЧ, вирусной нагрузки и генотипирование вируса проводилось методом ПЦР в режиме реального времени с использованием наборов «АмплиСенс ВПЧ ВКР скрин-титр-FL» и «АмплиСенс ВПЧ ВКР генотип-FL» ФГУН «ЦНИИЭ», определение статуса экспрессии онкогенов проводилось при помощи обработки образцов ДНКазой1, последующей обратной транскрипции и ПЦР с праймерами на область E7. Результаты. Среди протестированных 60 образцов 28 оказалось слабоположительными по наличию ДНК ВПЧ 16 типа, и 2 образца были уверенно положительные. Для исключения вероятности контаминации образцов в процессе операции, проводилась оценка присутствия РНК Е7 ВПЧ 16 типа в образцах. Среди 28 слабоположительных образцов в 5 случаях были выявлены следовые количества РНК E7, которые, судя по всему, являются остаточной ДНК неразрушенной ДНКазой и маловероятно доказывают присутствие ВПЧ. Среди 2х образцов уверенно положительных по ДНК ВПЧ в обоих случаях выявлена экспрессия E7 порядка 4 lg коп/мл. Вывод при анализе биоптатов РМП необходимо использовать не только определение наличия ДНК ВПЧ, но и выявление РНК ВПЧ для исключения ложноположительных результатов, возникающих вследствие различных причин и вводящих в заблуждение исследователей. При использовании данной схемы в 2х случаев РМП удалось подтвердить присутствие ВПЧ в опухоли, что требует продолжения исследований.
- Добавил в систему: Волгарева Галина Михайловна