Точечные аминокислотные замены в Са2+-связывающих центрах рековерина. III. Мутант с четвертым реконструированным Са2+-связывающим центромстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 29 мая 2015 г.
Аннотация:В отличие от рековерина дикого типа, в котором их четырех потенциальных Са2+-связывающих центров работают только два (2-й и 3-й), мутант +EF4 содержит еще один Са2+-связывающий центр, реконструированный их 4-го потенциального Са2+-связывающего центра путем введения в него аминокислотных замен с помощью сайт-направленного мутагенеза. Методами собственной флуоресценции и кругового дихроизма исследовано влияние замен в 4-м потенциальном Са2+-связывающем центре миристоилированного рековерина на структурные характеристики и конформационную стабильность этого белка. Показано, что свободная от Са2+ форма (апо-форма) полученного мутанта обладает более высокой кальциевой емкостью, существенно меньшей термостабильностью и заметно отличными вторичной и третичной структурами по сравнению с апо-формой рековерина дикого типа.