Место издания:ФБУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора Москва
Первая страница:24
Последняя страница:26
Номер статьи:УДК 616-036.22
Аннотация:Klebsiella pneumoniae является ведущим грамотрицательным бактериальным возбудителем внутрибольничных инфекций, особенно у лиц с ослабленным иммунитетом, имеющих злокачественные новообразования и подвергшихся длительной иммуносупрессии. Они вызывают широкий спектр заболеваний, включая эндобронхит, инфекцию мочевыводящих путей, холангит, бактериемию, абсцесс. В развитии внутрибольничной флоры основную роль играют штаммы с множественной лекарственной устойчивостью и гипервирулентностью, что, в свою очередь, приводит к высокоинвазивным инфекциям. Цель исследования: изучение молекулярно-генетических особенностей, в т.ч. механизмов антибиотикорезистентности штаммов K. pneumoniae, выделенных от пациентов ФГБУ НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина Минздрава России в период с 13.01.2021 г. по 23.09.2021 г. Материалы и методы. Объектом исследования явились штаммы K. pneumoniae (n=32). Идентификацию бактерий проводили на приборе MALDI-TOF Biotyper (Bruker, Германия). Чувствительность к 23 антибактериальным препаратам (АП) 5 функциональных классов (бета-лактамы, фторхинолоны, аминогликозиды, сульфаниламиды, и фосфомицин) определяли на приборе Vitek-2 Compact (bioMerieux, Франция) и интерпретировали по EUCAST-2021. Методом ПЦР со специфичными праймерами определяли гены бета-лактамаз blaTEM, blaSHV, blaCTX-M, blaOXA-48, blaKPC, blaVIM и blaNDM, интегразы классов 1 и 2 и соответствующие интегронные кассеты, ген поринового белка ompK36, а также гены, кодирующие факторы вирулентности: гипермукоидность (rmpA), аэробактин (aer1, aer2), поглощение железа (kfu), капсулообразование (wabG), синтез липополисахарида (uge_2), метаболизм аллантоина (allS и allR) и формирование фимбрий типа 1 (fimH). Результаты. Устойчивость к пенициллинам выявлена у 100% штаммов, к антибиотикам цефалоспоринового ряда - у 75% штаммов, к аминогликозидам - у 59,4% штаммов, к фторхинолонам - у 75% штаммов, к карбапенемам - у 50% штаммов. У всех изученных штаммов K. pneumoniae сохранялась чувствительность к колистину. Доля штаммов с множественной лекарственной устойчивостью (MDR) составила 75,0%, а с экстремальной устойчивостью (XDR) - 50%. Фенотип резистентности к бета-лактамам был ассоциирован с наличием генов бета-лактамаз: все штаммы K. pneumoniae имели гены blaSHV, 50% штаммов - гены blaTEM, 46,9% штаммов - гены blaCTX-M, 31,3% штаммов - гены blaOXA-48, 28,1% штаммов - гены blaNDM; 6,3% штаммов - гены blaKPC. При этом, у 21,9% штаммов выявлено одновременное присутствие двух генов карбапенемаз - blaOXA-48 и blaNDM. Интересно, что у 9,4% карбапенем-резистентных штаммов генов карбапенемаз не выявлено. Интегроны класса 1 были выявлены у 53,1% штаммов, в том числе несущие генные кассеты размером от 750 до 2200 п.н. - у 14 штаммов K. pneumoniae. Ген порина ompK36 присутствовал у всех штаммов. Анализ штаммов K. pneumoniae на наличие генетических детерминант вирулентности выявил гены глюкозилтрансферазы wabG и адгезина фимбрий I типа fimH у всех изученных штаммов, ген уридин-дифосфатгалактуронат-4-эмпиразы uge_2 - у 93,8% штаммов, ген регулятора гипермукоидного фенотипа rmpA - у 31,3% штаммов, оперон поглощения железа kfu - у 28,1% штаммов, оперон метаболизма аллантоина all - у 84,4% штаммов, гены аэробактина aer - у 18,8% штаммов. Обсуждение. У штаммов K. pneumoniae, выделенных от онкологических больных, ведущим механизмом формирования устойчивости к β-лактамным антибиотикам является сочетание генов бета-лактамаз blaTEM и blaSHV -типов, выявленное у 50,0% штаммов, что позволяет бактериям гидролизовать природные и полусинтетические пенициллины, наличие генов цефалоспориназ blaCTX-M -типов у 46,9% штаммов и генов карбапенемаз blaOXA-48, blaNDM и blaKPC-типов - у 43,8% штаммов, в том числе - сочетание генов карбапенемаз blaNDM и blaOXA-48 - у 21,9% штаммов. Карбапенем-резистентность 9,4% штаммов, не имеющих детектируемых генов карбапенемаз, по-видимому, обусловлена другими механизмами, например, изменением структуры пориновых белков. 18,8% штаммов K. pneumoniae отнесены к категории гипервирулентных, на основании наличия у них сочетания генов rmpA, aer1 и aer2.