Разобщающее влияние катионных пептидов, содержащих гидрофобные радикалы, на на функциональное сопряжение рецепторов серпантинного типа с ГТФ – связывающими белкамистатья

Работа с статьей


[1] Разобщающее влияние катионных пептидов, содержащих гидрофобные радикалы, на на функциональное сопряжение рецепторов серпантинного типа с ГТФ – связывающими белками / А. О. Шпаков, И. А. Гурьянов, В. И. Воробьев и др. // журнал Цитология. — 2004. — Т. 46, № 3. — С. 268–276. Одним из важнейших этапов передачи гормонального сигнала через аденилатциклазную сигнальную систему (АЦС) является взаимодействие активированного гормоном рецептора с гетеротримерным G-белком. Многочисленные данные литературы, а также наши собственные результаты указывают на то, что взаимодействующие с G-белками участки рецепторов, локализованные в их цитоплазматических петлях, имеют значительный по величине положительный заряд, способны образовывать амфипатические α-спирали и тесно ассоциированы с мембраной. В рамках изучения молекулярных механизмов передачи гормонального сигнала через АЦС мы исследовали влияние модельных катионных пептидов на базальную и стимулированную гормональными и негормональными агентами активность фермента аденилатциклазы (АЦ), а также на ГТФ-связывающую активность G-белков в скелетных мышцах крысы и гладких мышцах моллюска Anodonta cygnea. С использованием твердофазной методики были синтезированы три пептида, содержащие гидрофобные остатки каприновой кислоты (С10): Lys(C10)-His-Glu-Lys-Lys-(C10)-His-Glu-Lys-Lys(C10)-His-Glu-Lys-Lys(C10)-His-Glu-Lys-Ala-амид (пептид I), Cys-Lys(C10)-X-Tyr-Lys-Ala-Lys7-Trp-Lys-амид (II) и Cys-X-Trp-Lys-Lys(C10)-Lys2-Lys(C10)-Lys3-Lys(С10)-Туг-Lys-Lys(С10)-Lys-Lys-амид (III), где X - остаток ε-аминокапроновой кислоты. Значения IC50 для ингибирующего влияния пептидов на активность АЦ, стимулированную серотонином (моллюск) и изопротеренолом (крыса), составили: для пептида I - 56 и 70 мкМ, для пептида II - 32 и 47 мкМ, для пептида III - 22 и 28 мкМ соответственно. В то же время пептиды лишь незначительно снижали активность АЦ, стимулированную негормональными агентами (NaF, Gpp[NH]p и форсколином). Все пептиды стимулировали базальную активность фермента в обеих исследованных нами тканях. Максимальный стимулирующий эффект (28-52 %) наблюдался при их концентрации 10 мкМ. Пептиды в концентрации 10-100 мкМ повышали Gpp[NH]p-связывание в плазматических мембранах мышц моллюска и крысы. Наряду с этим они заметно снижали влияние на него гормонов. На основе полученных данных мы предположили, что катионные пептиды, содержащие гидрофобные радикалы, мимикрируют G-белоксвязывающие участки рецепторов и, таким образом, могут включаться в регуляцию функционального сопряжения рецептора с G-белком.

Публикация в формате сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл сохранить в файл скрыть