ВЛИЯНИЕ G-КВАДРУПЛЕКСНЫХ СТРУКТУР В ПРОМОТОРАХ ГЕНОВ НА ФУНКЦИОНИРОВАНИЕ ДНК-МЕТИЛТРАНСФЕРАЗЫ МЫШИ DNMT3A

Громова, Е.С.; Лойко, А.Г.; Сергеев, А.В.; Генатуллина, А.И.

Авторы: Громова Е.С., Лойко А.Г., Сергеев А.В., Генатуллина А.И.
Сборник: ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ 13-ой Международной научной конференции «БИОКАТАЛИЗ. ФУНДАМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ» (БИОКАТАЛИЗ - 2023), г. Суздаль, Россия | Июнь, 25-29 2023
Тезисы
Год издания: 2023
Место издания: ООО «АДМИРАЛ ПРИНТ» Москва
Первая страница: 63
Последняя страница: 63
Аннотация: У млекопитающих метилирование de novo остатков цитозина в CpG-сайтах ДНК осуществляется ДНК-метилтрансферазой (МТазой) Dnmt3a. Изменение статуса CpG-метилирования в промоторах генов имеет решающее значение для регуляции их экспрессии и может приводить к развитию онкологических заболеваний. Вблизи CpG-сайтов в промоторах располагаются гуанин-богатые последовательности, формирующиеG-квадруплексы (G4). Недавно было обнаружено потенциальное участие G4 в контроле метилирования ДНК. Целью данной работы стало установление взаимосвязи между наличием параллельных G4 в ДНК и функционированием МТазы Dnmt3a и ее отдельных доменов in vitro c использованием модельных ДНК, включая фрагмент онкогена c-MYC.промотора c-MYC. Сайты CpG (красные) подчеркнуты; флуорофоры TAMRA и FAMзеленые, стрелки указывают место расщепления эндонуклеазой Hin6I(сайт Hin6I GCGC).В качестве моделей использовали (i) G4-олигонуклеотиды TT(GGGT) 4 T или c-MYCT(G) 4 A(G) 3 T(G) 4 A(G) 3 T(G) 4 AАGG, способные сворачиваться в параллельные квадруплексы разной конформации и (ii) (GGGT) 4 –ДНК и c-MYC-ДНК (фрагмент онкогена c-MYC) с G4-олигонуклеотидами в виде выпетленных вставок (рис.1).Варьировали расстояние от метилируемого CpG в сайте Hin6I до G4 (за метилированием следили по защите от расщепления). Показано, что каталитический домен Dnmt3a, в отличие от регуляторного домена, эффективно связывается с G4-олигонуклеотидами.Такая же тенденция наблюдалась и в случае G4-ДНК. Метилирующая активность Dnmt3aэффективно ингибируется в присутствии G4-олигонуклеотидов за счет вытеснения 30-звенного ДНК-субстрата из ДНК-белковых комплексов. Образование G4 снижает степень метилирования (GGGT) 4 –ДНК и фрагмента промотора c-MYC. Уменьшение расстояния между G4 и CpG-сайтом приводит увеличению этого эффекта. Эффекты гипометилирования можно объяснить секвестированием Dnmt3a на структуре G4 и нарушением олигомеризации фермента на поверхности ДНК ввиду присутствия неканонической структуры. Формирование G4 в промоторе онкогена с-MYC можно рассматривать как одну из причин гипометилирования и, как следствие, гиперэкспрессии белка MYC, что приводит к развитию онкологических заболеваний. Поддержано грантом РНФ №22-24-00368.
Добавил в систему: Сергеев Александр Вячеславович

	ИСТИНА	Войти в систему Регистрация
	ИСТИНА ИНХС РАН
	Главная Поиск Статистика О проекте Помощь

ИСТИНА

ИСТИНА ИНХС РАН

ВЛИЯНИЕ G-КВАДРУПЛЕКСНЫХ СТРУКТУР В ПРОМОТОРАХ ГЕНОВ НА ФУНКЦИОНИРОВАНИЕ ДНК-МЕТИЛТРАНСФЕРАЗЫ МЫШИ DNMT3Aтезисы доклада

Прикрепленные файлы