Место издания:ООО фирма «Юлис» Москва, 09–11 ноября 2021 года
Первая страница:154
Последняя страница:155
Аннотация:Введение. Глиомы – наиболее частые опухоли голов- ного мозга, составляют 75% всех первичных злокачествен- ных опухолей головного мозга у взрослого населения. Из-за их агрессивного поведения на местном уровне и от- сутствия эффективных стратегий лечения, они представ- ляют собой один из самых смертоносных видов рака. Для диагностики и мониторинга глиом используют молекуляр- ное исследование опухоли пациента с использованием
образца биопсии и/или использования методов нейрови- зуализации, таких как магнитно-резонансная томография (МРТ) или компьютерная томография (КТ). Однако все эти методы имеют свои ограничения. Весь диагностический процесс вызывает стрессовое состояние пациента и дли- телен по времени. Необходимо дорогостоящее и труд- нодоступное оборудование, а в случае биопсии тканей, диагностика создает риск отека мозга и кровотечений.
Жидкая биопсия глиом – это малоинвазивный метод, кото- рый имеет большой потенциал во всех аспектах монито- ринга и лечения глиом: от обнаружения до изучения реак- ции опухоли на терапию и раннего рецидива.
Цель и задачи. Оценить диагностический потенциал циркулирующих микроРНК : hsa-miR-22-3p, h s a - m i R - 1 2 2 - 5p, hsa-miR-107, hsa-miR-324-5p, hsa-miR-155-5p, hsa-miR- 21-5p, hsa-miR-330-3p, hsa-miR-146a-5p, hsa-miR-92a-1-5p, hsa-miR-34a-5p в плазме крови пациентов с глиомой высо- кой степени злокачественности
Материалы и методы. В исследовании использова- лись 400 мкл образа плазмы 20ти пациентов и 10ти здоро- вых добровольцев. МикроРНК из образцов плазмы выде- ляли с использованием набора miRNeasy Serum/Plasma Kit (Qiagen, Германия). Синтез кДНК проводили с использова- нием универсального праймера с помощью E. coli Poly(A) Polymerase (NEB, США) и набора MMLV RT kit (Евроген, Россия). Для проведения ПЦР использовали HS Taq ДНК- полимераза (Евроген, Россия) и определяли величины от- носительной экспрессии 10 микроРНК: hsa-miR-22-3p, hsa-miR-122-5p, hsa-miR-107, hsa-miR-324-5p, hsa-miR-155- 5p, hsa-miR-21-5p, hsa-miR-330-3p, hsa-miR-146a-5p, hsa- miR-92a-1-5p, hsa-miR-34a-5p. В качестве рефреренсной микроРНК использовали экзогенную cel-miR-39-3p как внешний контроль. Расчет относительной экспрессии про- водился методом 2-ΔΔ Сt. Статистический анализ результа-
тов выполняли с использованием критерия Манна-Уитни. Результаты. Отличие в уровнях экспрессии микроР- НК в плазме крови пациентов против группы сравнения продемонстрировали микроРНК hsa-miR-22-3p (p<0,001), hsa-miR-122-5p (p=0,02), hsa-miR-107 (p<0,001), hsa-miR- 324-5p (p<0,001), hsa-miR-155-5p (p<0,001), hsa-miR-21- 5p (p<0,001), hsa-miR-330-3p (p<0,001), hsa-miR-146a-5p (p<0,001). Для оценки диагностической ценности иссле- дуемых микроРНК был проведен анализ кривых ROC. Для сигнатуры микроРНК hsa-miR-107 и hsa-miR-122-5p диа- гностическая чувствительность и специфичность соста- вила 100 % и 71,2 % соответственно (AUC=88.5%). Разра- ботана формула диагностической оценки (ДО) наличия HGG с использованием двух микро-РНК: ДО=0.661*2− (Ct107−Ct39)+0.241*2−(Ct122−Ct39). Если ДО <0,075, то риск отсутствует. Если у пациента ДО ≥ 0,075, с большой вероятностью у него глиальная опухоль высокой степени
злокачественности.
Выводы. Основываясь на результатах нашего иссле-
дования, циркулирующие микроРНК потенциально могут использоваться в качестве диагностического инструмента для глиальных опухолей высокой степени злокачествен- ности. Клиническая роль анализа циркулирующей ми- кроРНК, вероятно, может быть связана с МРТ-картиной и гистологическим типом опухоли, а также для мониторинга рецидива.