|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Направленная нейрональная дифференцировка клеток нейробластомы человека линии SH-SY5Y на 2D матриксах, содержащих модифицированные пептидами клеточной адгезии рекомбинантные спидроиныстатья Исследовательская статья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАКСтатья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
- Авторы: Курко О.Д., Давыдова Л.И., Сидорук К.В., Гривенников И.А., Дебабов В.Г., Богуш В.Г., Тарантул В.З., Долотов О.В.
- Журнал: Молекулярная генетика, микробиология и вирусология
- Том: 41
- Номер: 3
- Год издания: 2023
- Издательство: Медицина
- Местоположение издательства: М.
- Первая страница: 16
- Последняя страница: 24
- Аннотация: ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯВажным для создания тканеинженерных конструкций, предназначенных для лечения патологий нервной системы, является использование эффективных и недорогих подложек (2D матриксов) для культивирования и дифференцировки нервных клеток in vitro. Перспективными для решения этой задачи представляются рекомбинантные аналоги белков каркасной нити паутины пауков-кругопрядов — спидроинов 1 и 2. Целью исследования являлась оценка влияния клеточных подложек, полученных из смесей рекомбинантных спидроинов (РС) rS1/9 и rS2/12 с гибридными белками (ГБ), содержащими мономер rS1/9, слитый с биологически активными пептидами, на уровни экспрессии генов ключевых синапс-специфичных белков и жизнеспособности клеток нейробластомы человека линии SH-SY5Y при направленной холинергической дифференцировке.МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫПрименяли двухстадийную схему направленной холинергической дифференцировки клеток SH-SY5Y с использованием ретиноевой кислоты и нейротрофического фактора мозга (BDNF). Жизнеспособность клеток оценивали с помощью MTT-теста и окрашивания кристаллическим фиолетовым. Уровни мРНК исследуемых генов оценивали с помощью ПЦР в режиме реального времени.РЕЗУЛЬТАТЫНаправленная дифференцировка клеток SH-SY5Y сопровождалась существенным повышением уровней экспрессии генов синаптофизина, синапсинов I, II и постсинаптического белка PSD-95. Наибольшая жизнеспособность клеток и повышенные уровни экспрессии PSD-95 обнаружены при дифференцировке на подложке, состоящей из смеси РС rS1/9 и rS2/12 с ГБ, содержащими пептид RGDS (присутствующий в белках внеклеточного матрикса) и гепарин-связывающий пептид (HBP, фрагмент ламинина).ЗАКЛЮЧЕНИЕНаибольшую эффективность при направленной холинергической дифференцировке клеток SH-SY5Y показала подложка, состоящая из смеси РС rS1/9 и rS2/12 и ГБ на основе мономера РС rS1/9, слитого с RGDS (лиганд интегринов) и HBP (лиганд ростовых факторов и синдеканов). Подложки, состоящие только из РС rS2/12 или смеси rS2/12 с ГБ(RGDS) продемонстрировали более низкую эффективность, однако использование пептида GRGGL (взаимодействующего с нейральными молекулами клеточной адгезии и входящего в состав РС rS1/9) приводило к повышению эффективности.
- Добавил в систему: Долотов Олег Валентинович