Оценка пермиссивности и наработка рекомбинантных VSV на панели клеточных линий для создания платформы направленной эволюции VSVстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 24 июля 2024 г.
Аннотация:Онкологические заболевания являются одной из основных причин смертности в развитых странах. Иммунотерапия является действенным методом, позволяющим увеличить эффективность лечения онкологических заболеваний, однако недостаточная иммуногенность опухолевых клеток и недостаточное проникновение иммунокомпетентных клеток в ткань опухоли снижают ее эффективность. Для преодоления этого препятствия перспективным подходом является использование онколитических вирусов, созданных, например, на основе вируса везикулярного стоматита (VSV), специфично размножающегося в опухолевых клетках, что, помимо лизиса опухолевых клеток, запускает воспалительную реакцию в опухолевом очаге и активирует иммунную систему.
Методы генной инженерии позволяют создать рекомбинантные варианты VSV, в геном которых между
генами гликопротеина и большой полимеразы VSV, может быть встроен чужеродный ген, продукт экспрессии которого воздействует на иммунные клетки для более выраженной стимуляции противоопухолевого ответа (например, гены, кодирующие провоспалительные цитокины, хемокины и т.д.), а также вносить в геном вируса мутации, направленные на увеличение онкоселективности.
Отдельный интерес представляет изучение возможности применения онколитиков на основе VSV для лечения рака головы и шеи (РГШ), как одного из наименее изученных в данном направлении терапии. Рак головы и шеи занимает 6-е место по распространенности в России, и ежегодно выявляется более 24 тысяч новых случаев. Этот вид рака также является пятым по количеству летальных исходов в течение года от момента установления диагноза.
Общей целью исследования является получение инновационных рекомбинантых онколитиков на основе
VSV, которые будут эффективны при лечении широкого спектра онкологических заболеваний как за счет
увеличения онкоспецифичности, так и за счет рациональных модификаций вирусного генома. Для этого на начальном этапе работ необходимо было создать лабораторный процесс получения VSV и оценить пермиссивность рекомбинантных онколитиков на панели доступных раковых клеточных линий, включая линии РГШ.
В ходе выполнения работы была отработана лабораторная процедура получения VSV без использования хелперного вируса, что значительно упрощает процесс наработки, а также был отработан метод оценки вирусного титра по цитопатическому действию. Было проведено сравнение пермиссивности VSV на различных клеточных линиях, включая линию РГШ (SCCVII) и продемонстрирована разница в чувствительности клеток к проникновению VSV, а также проведена оценка влияния на эффективность репликации вируса и его пермиссивность мутации гена матричного белка ΔM51, которая по исследованиям ведущих научных лабораторий способствует аттенуации VSV в здоровых клетках.