|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Влияние метформина и ампролиума на сукцинилирование и глутарилирование низкомолекулярных белков в мозге крыстезисы доклада Тезисы
- Авторы: Емельянова А.А., Граф А.В., Карлина И.С., Буник В.И.
- Сборник: Материалы Международного молодежного научного форума «Ломоносов-2023»
- Редакторы: Алешковский Иван Андреевич, Андриянов Андрей Владимирович, Антипов Евгений Александрович, Зимакова Екатерина Игоревна
- Серия: География
- Тезисы
- Год издания: 2023
- Издательство: ООО "МАКС Пресс"
- Местоположение издательства: Москва
- Аннотация: Сукцинилирование и глутарилирование - посттрансляционные модификации белков с участием сукцинил-КоА и глутарил-КоА, которые продуцируются комплексами 2-ок- соглутаратдегидрогеназы (ОГДГ) и 2-оксоадипатдегидрогеназы (ОАДГ), использующи- ми дифосфат тиамина (витамина В1) в качестве кофермента. Поэтому ингибирование внутриклеточного транспорта тиамина - известное побочное действие таких лекарств как метформин и ампролиум (М+А) - может влиять на экспрессию генов за счет измене- ния ацилирования гистонов [1]. Цель работы - определить механизмы регуляции данными лекарствами сукцинилирования и глутарилирования гистон-содержащей фракции белков мозга.М+А вводили по двум схемам: 1. Циклами 5 введений + 2 дня перерыв в течение 25 дней, из них первые 3 дня по 200 мг/кг метформина и 40 мг/кг ампролиума и да- лее по 70 мг/кг метформина и 40 мг/кг ампролиума; 2. Ежедневно по 150 мг/кг мет- формина и 40 мг/кг ампролиума в течение 30-ти дней. Для Вестерн-блоттинга исполь- зовали первичные антитела на сукцинилирование #PTM-401 (PTM Biolabs, США, раз- ведение 1:3000), глутарилирование #PTM-1151 (PTM Biolabs, США, разведение 1:2000), десукцинилазу/деглутарилазу сиртуин 5 #8782 (Cell Signaling Technology, США, разве- дение 1:2000), ОГДГ #PA5-28195 (ThermoFisher, разведение 1:2000), ОАДГ #PA5-24208 (ThermoFisher, разведение 1:400) и конъюгированные с пероксидазой вторичные антитела #P-GAR Iss (Имтек, Россия, разведение 1:3000).При низкой дозе метформина и прерывистом введении М+А наблюдали снижение уровней сукцинилирования белков 15 и 16 кДа и экспрессии ОГДГ. Глутарилирование данных белков, экспрессия ОАДГ и сиртуина 5 не менялись. Напротив, при высокой дозе метформина и ежедневном введении М+А изменений в сукцинилировании низкомолеку- лярных белков и экспрессии ОГДГ не наблюдали. Глутарилирование же белков 15 и 16 кДа, экспрессия ОАДГ и сиртуина 5 увеличивались.Отрицательный заряд гистонов, возрастающий при сукцинилировании или глутарили- ровании, препятствует их взаимодействию с ДНК. Ожидаемое при росте глутарилирова- ния гистон-содержащих белков мозга усиление белковой транскрипции подтверждается ростом экспрессии ОАДГ и сиртуина 5. Напротив, падение сукцинилирования низкомоле- кулярных белков мозга соответствует снижению экспрессии ОГДГ. Отсутствие эффектов ежедневного введения М+А на сукцинилирование низкомолекулярных белков и экспрес- сию ОГДГ свидетельствует о компенсаторном значении роста глутарилирования гистонов.Результаты показывают, что хроническое действие М+А меняет сукцинилирование или глутарилирование гистон-содержащей фракции белков мозга в соответствии с регуляцией тиамин-зависимых процессов на уровне экспрессии белков.Финансирование. Работа поддержана грантом РФФИ No 20-54-7804
- Добавил в систему: Буник-Фаренвальд Виктория-Лариса Ивановна