|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
РОДОВАЯ ИДЕНТИФИКАЦИЯ ГЕМОКУЛЬТУР С ПРИМЕНЕНИЕМ МЕТОДА ГАЗОВОЙ ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК- Авторы: Овсеенко С.Т., Попов Д.А., Вострикова Т.Ю., Осипов Г.А.
- Журнал: Бюллетень НЦССХ им. А.Н. Бакулева РАМН. Сердечно-сосудистые заболевания
- Том: 12
- Номер: S6
- Год издания: 2011
- Издательство: Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр сердечно-сосудистой хирургии имени А.Н. Бакулева" Министерства здравоохранения Российской Федерации
- Местоположение издательства: Москва
- Первая страница: 214
- Аннотация: Цель: показать возможности применения данного метода для идентификации различного рода микроорганизмов с целью ранней диагностики батериемий. Материалы и методы: инкубация гемокультур осуществлялась по стандартному протоколу во флаконах FA Aerobic Bottle. При выявлении положительной гемокультуры проводили ее идентификацию и исследовали чувствительность к антибиотикам на анализаторе Vitek 2 compact (Biomerieux, Франция). Параллельно с традиционными методами, содержимое положительных флаконов исследовано методом газовой хромато-масс-спектрометрии (ГХ-МС). Образец в объеме 4 мл центрифугировали, осадок, содержащий клетки микроорганизмов, высушивали и подвергали кислому метанолизу в 1,2N HCl в метаноле (1 час, 80оС). Далее реакционную смесь экстрагировали гексаном, экстракт высушивали, силилировали в 20 мкл реактива BSTFA. Анализ проводили на системе ГХ-МС 6890/5973 (Agilent Technologies, USA). Результаты: в 70 исследованных гемокультурах традиционным методом выделены 14 видов микроорганизмов: A. baumannii (n=13), K. pneumoniae (n=11), P. aeruginosa (n=3), E. coli (n=1), S. maltophilia (n=1), S. marcescens (n=1), S. aureus (n=5) S.. epidermidis (n=8), S. haemolyticus (n=8), S. hominis (n=3), E. faecalis (n=4), E. faecium (n=5), C. parapsilosis (n=6), C. albicans (n=1). Те же микроорганизмы, но с идентификацией до рода, были детектированы по жирнокислотному спектру с помощью метода ГХ-МС. Интенсивность сигнала микробных маркеров в исследованных образцах (изо- и антеизо¬пентадекановой, изо- и анте-изогептадекановой, антеизононадекановой кислот (маркеры Staphylococcus), 3-гидрокси- и 2-гидроксидодекановой кислот (маркеры Acinetobacter), циклогептадекановой и β-оксимиристиновой кислот (маркер Klebsiella), 3-гидрокси-, 2-гидроксидодекановой и 9,10-метиленгексадекановой кислот (маркеры Pseudomonas), 3-гидрокси-, 2-гидроксидодекановой, 9-,10-метиленгексадекановой и 11-,12-метиленнонадекановой кислот (маркеры Escherichia), изо-3-гидрокситридекановой и 2-гидроксидодекановой кислот (маркеры Stenotrophomonas), 3- и 2-гидрокситетрадекановых, 9,10-метиленгекса- и 11-,12-метиленнонадекановых кислот (маркеры Serratia) и гептадеценовой кислоты (маркер Candida)) в соответствующих образцах в десятки раз превышала уровень контроля – отрицательной гемокультуры. Выводы: полученные результаты свидетельствуют о возможности сокращения времени родовой идентификации микроорганизмов с помощью метода ГХ-МС до трех и менее часов против 1,5-2 суток при традиционном подходе.
- Добавил в систему: Овсеенко Светлана Тимофеевна