|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
A Luciferase-Based Approach for Functional Screening of 5′ and 3′ Untranslated Regions of the mRNA Component for mRNA Vaccinesстатья Исследовательская статья
Статья опубликована в высокорейтинговом журнале
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus- Авторы: Rubtsova Maria, Mokrushina Yuliana, Andreev Dmitry, Poteshnova Maria, Shepelev Nikita, Koryagina Mariya, Moiseeva Ekaterina, Malabuiok Diana, Prokopenko Yury, Terekhov Stanislav, Chernov Aleksander, Vodovozova Elena, Smirnov Ivan, Dontsova Olga, Gabibov Alexander, Rubtsov Yury
- Журнал: VACCINES
- Том: 13
- Номер: 5
- Год издания: 2025
- Номер статьи: 530
- DOI: 10.3390/vaccines13050530
- Аннотация: Недавняя пандемия COVID-19, вызванная инфекцией SARS-CoV-2, выявила необходимость в протоколах для быстрой разработки эффективных методов скрининга для поиска оптимальных структур вакцин мРНК против мутабельных вирусных агентов.Непревзойденный успех вакцин мРНК от Pfizer и Moderna, кодирующих белок шипа SARS-CoV-2, подтверждает потенциал липидных наночастиц для доставки мРНК для ускоренной разработки новых вакцин. Эффективность вакцинации и стоимость производства вакцин на основе мРНК во многом зависят от состава компонентов мРНК,поскольку синтез иммуногенного белка требует точной и эффективной трансляцииin vivo. Состав комбинаций 5′ и 3′ НТО мРНК оказывает сильное влияние на эффективность трансляции. Основной целью данного исследования было повышение вероятностипродукции иммуногенного белка, кодируемого мРНК вакцины. Для этой цели мыпредложили найти новую комбинацию природных UTR и параллельно с этим разработатьи протестировать систему для in vivo отбора трансляционно активных UTR. Методы:С помощью анализа Ribo-Seq были получены наборы кандидатов коротких UTR. Эти UTR были протестированыкак в клеточных культурах, так и на мышах для эффективной продукции секретируемой нанолюциферазы (NLuc)и белка S SARS-CoV-2. Комбинация наиболее эффективных UTR была использованадля создания прототипа мРНК-вакцины, способной индуцировать нейтрализующие антителапротив коронавируса. Результаты: Полезность выбранных UTR для разработки вакциныбыла проверена путем вовлечения полноразмерной кодирующей последовательности белка S SARS-CoV-2 дляпродукции основного иммуногена. В результате была создана система функционального скрининга UTR с использованием гена NLuc. Выводы: Предложенный подход позволяет проводить неинвазивную количественную оценку трансляционной активности UTR в сыворотке кровимышей. Используя полноразмерную последовательность белка S SARS-CoV-2 в качестве прототипа, мыпродемонстрировали, что комбинация UTR, выбранных с помощью нашего анализа репортера на основе люциферазы,вызывает титры IgG и показатели нейтрализации, сопоставимые с полученными при использовании UTR из коммерческих вакцин мРНК на основе S-белка.
- Добавил в систему: Рубцова Мария Петровна
Прикрепленные файлы
| № | Имя | Описание | Имя файла | Размер | Добавлен |
|---|