РЕГУЛЯЦИЯ КАТАЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ РЕКОМБИНАНТНОЙ L-АСПАРАГИНАЗЫ RHODOSPIRILLUM RUBRUM ПУТЕМ ЕЕ КОНЪЮГИРОВАНИЯ С ПЭГ-ХИТОЗАНОМстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 24 октября 2018 г.
Аннотация:Предложен новый подход для регуляции каталитических свойств медицинскизначимого фермента L-аспаргиназы, основанный на образования конъюгатов сПЭГ-хитозаном (хитоПЭГилирование). Эффективность данного подхода продемон-стрирована на примере рекомбинантной L-аспарагиназы из Rhodospirillum rubrum(RrA). Данный препарат иммунологически отличается от используемых в медицинепрепаратов L-аспарагиназы E. coli, что определяет перспективы его использованияв качестве альтернативы при развитии гиперчувствительности. Преимущество RrAсостоит в низкой активности по L-глутамину, что существенно снижает вероятностьвозникновения побочных эффектов. Разработана методика синтеза конъюгатов RrAс ПЭГ-хитозаном разной степени модификации. Установлено, что конъюгированиеRrA с ПЭГ-хитозаном увеличивает удельную активность фермента по сравнениюс нативным ферментом. Активность изменяется от 56 МЕ/мг (для нативного фер-мента) до 61–72 МЕ/мг (для коньюгатов) в зависимости от степени ПЭГилированияхитозана. Вторичная структура конъюгатов Rhodospirillum rubrum с ПЭГ-хитозаномисследована методами КД- и ИК-спектроскопии. Обнаружено, что при образованииконъюгатов с ПЭГ-хитозаном структура фермента претерпевает лишь незначи-тельные изменения: содержание α-спиралей изменяется от 36% (для нативногофермента) до 30–33% (для конъюгатов). Содержание β-структур изменяется от 15%(для нативного фермента) до 18% (для конъюгата). Полученные данные открываютпути для синтеза препаратов L-аспарагиназы с улучшенными биокаталитическимисвойствами.