ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Для решения главной задачи проекта выполнены исследования, направленные на разработку оптимальных методик функционализации наноалмаза (НА), синтеза конъюгатов НА с биологически активными соединениями (БАВ) и исследования их биологической активности. 1. Показано, что для получения хлорированного НА вместо жидкофазного хлорирования раствором молекулярного хлора в четыреххлористом углероде предпочтительнее проводить хлорирование в газовой фазе при повышенной температуре (325 оС). При этом содержание ковалентно связанного хлора на поверхности образцов хлорированных НА достигает, по данным РФЭС, 6,24% ат. 2. Оптимизированы методики синтеза конъюгатов НА-амикацин, НА-пиразинамид, НА-изониазид, НА-амфотерицин В. Полученные материалы охарактеризованы с помощью комплекса инструментальных физических и физико-химических методов исследования, а также изучена их специфическая биологическая активность. Показано, что к наибольшей биоактивности приводит ковалентная иммобилизация, причем влияет не только способ иммобилизации, но и другие факторы, включая стадии подготовки уже готового конъюгата к биологическому тестированию, и прежде всего, наличие антиоксидантов и лиофильное высушивание. 3. Установлено, что образцы НА с ковалентно связанным и адсорбированным амикацином проявляют антибактериальную активность в отношении Staphylococcus aureus FDA 209P и Escherichia coli ATCC 25922 in vitro на уровне контроля, тогда как в отношении метициллин-резистентного штамма St. aureus INA 00761, устойчивого и к амикацину, антибактериальный эффект отсутствует. 4. Выявлено, что конъюгат НА с противогрибковым средством амфотерицином В проявляет фунгицидную активность в отношении Candida albicans ATCC 24433 и Candida parapsilosis ATCC 22019 in vitro, соизмеримую с активностью исходного амфотерицина В. 5. Выявлены закономерности влияния наноалмазов с различным функциональным составом поверхности (НАисх, НА-Н, НА-СООН, НА- Cl, HA-NH2), на основные показатели (мембранный потенциал, кальциевая емкость и редокс-состояние) функционирования изолированных митохондрий, выделенных из печени крыс. Полученные результаты позволили предложить способ применения изолированных митохондрий печени крыс в качестве биомодели для экспресс-оценки in vitro бионеэквивалентности образцов наноалмазов и обосновать влияние НА на биоэнергетику и активность клеток при применении НА в системах доставки лекарств на основе не только НА, но и других твердых частиц.