ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Объекты исследования - пирофосфат железа, аскорбиновая кислота, магния оксид. Цель исследования - разработка методик получения липосом с пирофосфатом железа, аскорбиновой кислотой, магния оксидом. Методологическую основу исследований составили труды российских и зарубежных ученых в области создания липосомальных лекарственных форм и 40-летний опыт исследований, проведенных в лаборатории разработки лекарственных форм. Выбран метод и разработана методика для количественного определения пирофосфата железа, включавшегося в липосомы. Содержание железа определяли спектрофотометрически. В основе метода лежит реакция комплексообразования между ионами железа и 5-моносульфосалициловой кислотой с образованием Fe(SSal)n. Разработан состав липосомальной дисперсии, содержащей в 1 мл 10 мг железа пирофосфата с включением его в липосомы до 90% и размером частиц до 180 нм. Предложена следующая пропись липосомальной дисперсии (20 мл): железа пирофосфат - 200 мг; фосфатидилхолин S PC - 1000 мг; холестерин - 100 мг; полиэтиленгликоль-2000-дистеароилфосфатидилэтаноламин - 20 мг; сахароза - 4000 мг; вода - до 20 мл. Изучены спектральные характеристики аскорбиновой кислоты, выбран метод ее количественного анализа в липосомальной дисперсии и лиофилизате. Количественное определение аскорбиновой кислоты в липосомальной дисперсии и лиофилизате проводили по стандартной спектрофотометрической методике с использованием рабочего стандартного образца аскорбиновой кислоты при длине волны 243 ± 4 нм. Измерение оптической плотности спиртовых растворов проводили относительно 95%-ного этилового спирта в кюветах с толщиной оптического слоя 10 мм в диапазоне длин волн 200 - 350 нм. В качестве раствора сравнения использовали 95%-ный этиловый спирт.Показано, что липосомальная дисперсия имеет один максимум поглощения при 247 нм, что соответствует поглощению аскорбиновой кислоты. Выбраны состав и метод получения липосом с аскорбиновой кислотой с наилучшим ее включением в липосомы. Показано, что включение аскорбиновой кислоты в липосомы без использования рН-градиента составило 22%. Включение аскорбиновой кислоты разными методами с использованием рН-градиента незначительно различалось (75 и 78%). Для стабилизации липосом с аскорбиновой кислотой разработан режим замораживания и сублимационной сушки. После сублимации включение аскорбиновой кислоты в липосомы и их размер после регидратации не изменились. В результате исследований выбран состав и подобраны оптимальные условия технологического процесса получения липосом с аскорбиновой кислотой со средним размером частиц не более 160 нм и включением ее в липосомы 75 - 78%. Изучены свойства соединений магния как потенциальных объектов для получения липосом. В качестве соединения для получения липосомального препарата выбран магния цитрат. В связи с невозможностью количественного определения магния цитрата спектрофотометрическим методом как субстанции, так и в последующем в составе липосом, для этой цели предложено использование гравиметрического анализа. Выбраны компоненты для создания липосом с магния цитратом на основе их функционального назначения: в качестве основного компонента, формирующего мембрану липосом. Поскольку наибольший уровень включения активного вещества в липосомы (82%) и наименьший размер везикул получены при использовании липидной композиции с молярными соотношениями компонентов соевый фосфатидилхолин/холестерин/пэгилированный дистеароилфосфатидилэтаноламин 276:54:1, данный состав выбран в качестве рабочего для дальнейших исследований.