ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Для отработки разрабатываемого подхода, выяснения особенностей ответа микро-организмов и их популяций на биохимическом и генетическом уровне на комбинированное воздействие стрессоров и антистрессоров продолжены исследования по уточнению оптимальных условий комбинированного воздействия стрессоров и антистрессоров при глубинном культивировании дрожжей Rh. rubra, при комбинированном воздействии на микроводоросли, при биологической очистке сточных вод и природных водоемов, при анализе генетического ответа у рекомбинантных бактерий B. subtilis с выбранной тест-системой. Показано, что концентрация вносимого пероксида водорода влияет на выход каро-тиноидных пигментов, синтезируемых дрожжами Rh. rubra. Также большое значение имеет время внесения H2O2 в культуральную среду в зависимости от фазы развития дрожжей. Адаптация дрожжей Rh. rubra к воздействию пероксида водорода не приводит к увеличению выхода каротиноидных пигментов, что, возможно, связано с запуском аль-тернативных механизмов защиты клетки от агентов окислительного стресса. При сов-местном воздействии пероксида водорода и облучения синим светом происходит увели-чение удельного содержания каротиноидов на 17%, по сравнению с культивированием в отсутствие освещения, но с внесением H2O2. Однако, накопление биомассы в отсутствие освещения выше, чем при облучении синим светом, в результате чего выход каротино-идных пигментов с 1 л культуральной жидкости в первом случае на 14% выше, чем во втором. С использованием методов последовательных пересевов изучены процессы адап-тации и деадаптации к пероксиду водорода микроводорослей, выделенных из модельного стока. Показано, что выделенные культуры микроводорослей обладают как автотрофным, так и гетеротрофным типами питания и, с одной стороны, ускоряют скорость очистки, с другой – снижают качество очистки на конечном этапе. Сделан вывод, что основным способом борьбы с избыточным ростом микроводорослей в разрабатываемом методе очистки может быть поддержание освещения обрабатываемой среды на уровне, достаточном лишь для протекания фоторепарации у микроорганизмов активного ила, но недостаточном для интенсивного роста микроводорослей. Показано, что для изучения роста бактерий – продуцентов рибофлавина в условиях контролируемого окислительного стресса можно использовать штаммы бацилл, несущие ген ribA, в частности, штамм B. subtilis 32 (ribA::Mutin2), с измерением возрастания удельной β-галактозидазной активности в состоянии оксидативного стресса. Данный штамм может служить подходящей тест-системой для изучения воздействия факторов окислительного стресса на рост бацилл, биосинтез ими рибофлавина и прооксидантной активности последнего. При этом для бациллярных продуцентов рибофлавина маркером ответа на оксидативный стресс может быть ген ribA.