ИСТИНА

Подавляющее большинство эукариотических мРНК моноцистронны, т.е. кодируют только один функциональный полипептид. Тем не менее, в 5’-нетранслируемых областях многих из них содержатся короткие рамки считывания (uORF), которые могут регулировать экспрессию основной кодирующей части. После трансляции uORF перед терминировавшей рибосомой встаёт выбор: возобновить сканирование с последующим узнаванием нижерасположенного стартового кодона или диссоциировать с мРНК, что приведёт к отсутствию основного продукта. До недавнего времени считалось, что в принятии этого решения задействованы только классические факторы инициации трансляции (прежде всего, eIF3). Нам удалось обнаружить новое семейство эукариотических трансляционных факторов, контролирующих рециклинг рибосомной 40S субчастицы на стоп-кодоне и последующую реинициацию трансляции с её участием. Было показано, что фактор eIF2D, а также гетеродимер онкобелков MCT-1 и DENR (гомологичных N- и C-концевым частям eIF2D, соответственно) способны обеспечивать ГТФ-независимое связывание тРНК в P-сайте 40S субчастицы рибосомы, стабилизируя или, наоборот, дестабилизируя её комплекс с мРНК. Изучение функций дрожжевых ортологов этих факторов (TMA64, TMA20 и TMA22) с помощью методов рибосомного профайлинга нокаутных штаммов и in vitro трансляции в дрожжевой бесклеточной системе позволило предположить, что белки необходимы для предотвращения ненужной реинициации после прочтения рибосомой основной кодирующей части мРНК, а также для подавления несанкционированной реинициации после трансляции uORF. Анализ кристаллической структуры комплекса MCT-1/DENR с человеческой 40S субчастицей позволил понять механистические основы данной активности. Мы показали, что SUI1-домен DENR связывается с пост-терминационным комплексом аналогично тому, как это делает фактор eIF1 в инициаторном комплексе, влияя на аккомодацию деацилированной тРНК. Одновременно другие участки димера стерически препятствуют посадке eIF2, eIF3 и прочих компонентов инициаторного комплекса. Предложена модель, согласно которой белки MCT-1/DENR и eIF2D контролируют реинициацию трансляции, предотвращая связывание канонических факторов инициации на 3’-конце основной рамки, но в ряде случаев разрешая её после прочтения uORF.